正常猪外周血淋细胞cdna文库部分est序列的电子克隆及初步实验验证.pdfVIP

广西大学硕士论文 正常猪外_I爿血淋巴细胞部分ESTs序列的电子克隆及初步实验验证 正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库部分EST序列的电子克隆及初步 实验验证 摘要 近来，通过电子克隆而获得的猪新基因多与猪的毛色、脂肪代谢、肉 质、生殖机能等重要经济性状相关，而与猪体先天性及特异性免疫反应相 关的基因鲜有报道，本研究拟探寻利用生物数据库进行电子克隆获得部分 乃至全长基因的方法，试图快速克隆出影晌病毒复制及抗病毒免疫相关的 猪新基因。 本研究对来自正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库测序所得的部分EST序 进行了基因注释，证实它们均得到了有效延伸，具有完整开放阅读框，其 中已知的猪基因序列14条，猪新基因序列6条，分别从已知猪基因序列和 未知猪基因序列中各抽取一条感兴趣序列进行全长cDNA的预测，它们的编 号分别为ESTconti9110和EST conti9133，设计特异引物对两条候选序 列进行克隆与测序，结果与电子克隆所得序列一致，证实了电子克隆的有 效性。本研究还对猪的新基因——60s核糖体蛋白L18a亚基作了蛋白质基 本理化性质、疏水性和二级结构的初步预测。人的这个蛋白与丙型肝炎病 毒mRNA上的内部核糖体入口序列产生相互作用，在病毒蛋白的正确翻译过 讵常猪外周m淋巴细胞部分ESTs序列的电子克隆及初步实验验证 程中起重要作用，具有重要研究价值。 关键词 电子克隆 表达序列标签(EST)猪外周血淋巴细胞 核糖体蛋白 ￡堕查堂堡主堡壅 巫堕堕!!堡垒塑里型望墅坌堕曼堡型塑鱼王塞堕墨塑生壅墼壁竺 INSILICOCLONINGPARTIALESTSFROMCDNALIBRARY OFNORMAL SWINEPERIPHERALBLOODLYMPHOCYTESAND EXPERIMENTAL IDENTIFICATION ABSTRAT ofswiRe obtainedSiI iCO RecentIY．mostgenes were by CIoning reIatedtoits economiC ascoIorofhai important characters．such rs I metabol ism．meat abiI SO ipid quaIity，reproduction on ity。and However．theaSSOCiatedWithinnate and genes immunity adaptive were munity thiS tofind seIdomIYreported．Instudy．WE