牛结核分枝杆菌g85b基因的克隆表达及elisa检测方法的初步建立.pdfVIP

摘 要 boris)弓l起的一种人兽共患的 牛结核病主要是由牛分枝杆菌(Mycobacterium 慢性、消耗性传染病。牛结核病原菌可以感染入和多种动物，其中，牛是最易感的 动物特别是奶牛。人类与牛的关系较为密切，据调查10％以上的人结核瘸是由牛分 枝杆菌引起的，因此牛分枝杆菌是人结核病的重要病原，所以掌握和应用离敏感、 高准确率的牛结核检疫方法是防止患结核病牛的半分棱杆菌感染人类的重要手段 之一。 经测亭帮EcoR l和K≯娃l双酶切鉴定，获得豳性重组质粒pET32．A985B，将阳性 SDS．淞G譬和Western．Blot检测分睾厅，表鞠蛋白成功表达，丽且能够与孛结核阳性 血清反应，经His．bind柱子纯化后获得纯度较高的A985B蛋白。 包被浓度、血清稀释度、封闭液、及底物作用时间等方面进行选择和优化，而且对 A985B．ELISA，由于实验动物较少二者的符合性差别不明显。 关键词：牛分枝杆菌；A985B：克隆；表达；PPD；ELISA of BovisAnd