东南景天锌超积过程中基因表达差异的cdna-aflp分析.pdfVIP

致谢 本论文是在导师杨肖娥教授悉心指导下完成的．从论文的选题和构思、试验方 法的设计和实施、数据处理和论文撰写等方面都倾注了导师无数的心血．恩师严谨的 治学态度、渊博的专业知识，锐敏的学术思想以及勤勉的敬业精神让我终身受益，将 激励我在今后人生道路上不懈努力和开拓进取．三年多来，导师在学习和生活上给予 的照顾，对我科研业务能力的培养，让我倍受感激，在此，谨向恩师致以崇高的敬意 和诚挚的感谢! 在攻读博士学位过程中得到了何振立教授、倪吾钟教授、叶正钱教授、魏幼璋 教授，冯荚副教授、李廷强副教授、彭红云副教授等很多老师的热心指导和帮助，谨 此表示真诚的感谢! 感谢在浙江大学学习期间各级领导和老师给予的关心和指导，感谢研究生科钱 秀萍老师的大力支持，感谢试验室技术员胡国相、朱凤珍、张素霞在试验过程中提供 的诸多方便． 感谢张敏、田生科、卢玲丽、梁俊、陈文荣同学在试验中的大力帮助．感谢郝 虎林、柳丹、熊集兵、Ejaz、贾彦博、荆延德，孟凡花，金晓芬、张玲，孙权、鲁红 娟、吴湘、姜宏等常会庆、方云英、丁学锋、蔡景波、朱艳霞、焦蓉婷、孙春燕、 刘勇军，吴春勇，胡绵好、何万领、王蕊等同学营造了良好的研究气氛和学习环境， 使我能够顺利完成博士论文． 感谢我的父母，感谢他们多年来对我的养育和教育，为了我读书，他们省吃俭用， 劳苦一生，没有你们，就没有今天的我；感谢我的妻子杨惠娟，与我同甘共苦，陪伴 我走过了这一段艰苦的日子．感谢我所有的亲人，对我求学的理解、支持和无私的关 爱。 感谢所有给予我指导、帮助和支持的领导、老师和同学以及将要参加评阅和答辩 ’ 的各位专家，教授在百忙中付出的辛勤工作! 感谢所有关心和支持我的人! 晁岳恩 2008年3月于浙江大学 中文摘要 由于重金属超积累植物在治理重金属污染土壤方面，有广阔的应用前景，已 引起国际土壤——植物营养学界和环境科学界的浓厚情趣和政府部门的高度重视。但 目前对植物超积累重金属机制认识的不足限制了该技术的应用和改良。东南景天 (Sedum口蜘前Halite)是在我国东南部地区一些古老的铅锌矿区发现的一种新的锌／ 镉超积累植物，同时对铅具有富集作用。本研究以超积累东南景天为材料，以其他近 缘种为对照，分析了铅锌矿区东南景天在长期的重金属胁迫条件下，进化成超积累植 物后的基因组变异情况；以及利用cDNA．AFLP技术对超积累生态型东南景天在锌超 积累过程中的基因表达差异进行研究；另外还采用水培方法，观察超积景天在锌镉积 积累过程中的作用，取得的主要研究结果如下： 1．植物长期生长在重金属污染的生境中，逐渐进化成不同的生态型，利用我国原生 的Zn／Cd超积累生态型东南景天(Hyperaccumulatedecotype：HE)为材料，以与 其亲缘关系较近的非超积累生态型东南景天(Ⅻ怒)、圆叶景天(SedumMakinoi Maxim：SMM)、凹叶景天(Sedum emarginatum Sarmentoum Makino：SBM)为对 Bunge：SSB)以及株芽景天(SedumBulbifeium 照，利用RAPD方法，研究超积累生态型东南景天基因组变异的程度，并对部分 超积累景天特有的PCR条带进行测序，分析特异基因片段与超积累的关系。遗传 进化树分析表明：六种不同生态型的景天可以分成两组，其中两种东南景天为一 组，另外四种为一组；超积累生态型和野生型东南景天有着相似的遗传背景，相 似系数显示变异程度已超过种的界限。说明污染土壤对植物的进化有着非常大的 影响：部分超积累景天特异PCR片段测序表明，ATP．硫酰化酶(ATP