北方部分省市番黄化曲叶病毒的检测鉴定及辣椒分离物侵染性克隆构建.pdfVIP

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2016-02-23 发布于贵州
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北方部分省市番黄化曲叶病毒的检测鉴定及辣椒分离物侵染性克隆构建.pdf

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北方部分省市番黄化曲叶病毒的检测鉴定及辣椒分离物侵染性克隆构建

资助英文缩略表目录中文摘要……………………………………………………………………………………I Abstract……．………………．…………．………………．…………．……．……………………………………………．．III 1 1猗言……………………………………………………………………………………………………………………．．1 1．1双生病毒的概况…………………………………………………………………………．1 1．1．1双生病毒的结构特征…………………………………………………………………．．1 1．1．2双生病毒的分类………………………………………………………………………一2 1．2双生病毒的侵染过程……………………………………………………………………．3 1．2．1双生病毒的复制………………………………………………………………………。3 1．2．2双生病毒的转录………………………………………………………………………．．3 1．2．3双生病毒的移动…………………………………………………………………………3 1．3番茄黄化曲叶病毒………………………………………………………………………．4 1．3．1番茄黄化曲叶病毒分类及特征………………………………………………………．．4 1．3．2番茄黄化曲叶病毒病的发生情况……………………………………………………．．4 1．3．3田问寄主范围……………………………………………………………………………5 1．3．4番茄黄化曲叶病毒病害的生物学特性………………………………………………一6 1．3．5番茄黄化曲叶病毒的接种……………………………………………………………．．7 1．3．6番茄黄化曲叶病毒的检测……………………………………………………………．．8 1．4番茄黄化曲叶病毒的防治………………………………………………………………．9 1．5本研究的目的和意义……………………………………………………………………10 2材料与方法…………………………………………………………………………………12 2．1材料………………………………………………………………………………………12 2．1．1病毒样品的采集和植物材料…………………………………………………………12 2．1．2菌株和载体……………………………………………………………………………12 2．1．3酶与各种生化试剂……………………………………………………………………．．14 2．1．4实验所需试剂及配制…………………………………………………………………14 2．1．5主要实验仪器…………………………………………………………………………15 2．1．6寡核苷酸引物及合成…………………………………………………………………16 2．2实验方法…………………………………………………………………………………l7 2．2．1毒源病株PCR检测…………………………………………………………………．．17 2．2．2番茄黄化曲叶病毒分离物基因扩增、序列测定及分析……………………………19 2．2．3 TYLCV辣椒分离物侵染性克隆的构建………………………………………………24 3结果与分析………………………………………………………………………………．．32 3．1TYLCV分离物基因组扩增结果………………………………………………………。32 3．1．1 3．1．2 TYLCV分离物全长的扩增及序列测定………………………………………………32 3。2 TYLCV分离物全长序列分析…………………………………………………………．．34 3．2．1 TYLCV分离物序列核苷酸相似性分析………………………………………………34 3．2．2系统进化树分析………………………………………………………………………37 3．2．3遗传多样性分析………………………………………………………………………40 3．2．4重组分析………………………………………………………………………………40 3．2。5种群统计分析…………………………………………………………………………41 3．3TYLCV-LJ侵染性克隆构建结果………………………………………………………．45 3．3．1 3．3．2侵染性克隆接种番茄、本生烟、辣椒的结果………………………………………．47 4结论与讨论………………………………………………………………………………．．50 4。lTYLCV吉林和辽宁省分离物的鉴定…