嗜热真菌热稳定维素酶的分子改造及特性研究.pdfVIP

嗜热真菌热稳定维素酶的分子改造及特性研究.pdf

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嗜热真菌热稳定维素酶的分子改造及特性研究

英文缩略词及中文对照表’~姆~ 目录 中文摘要……………………………………………………………………………………….-l A山咖ct…………………………………………………………………………………………………………………..1Ⅱ 】【弓l言……………………………………………………………………………………………………………………….1 1.1纤维素的研究概况…………………………………...…………………………………。l‘ 1.1.1纤维素的化学组成及结构……………………………………………………………一1 1.1.2纤维素的降解…………………………………………………………………………。2 1.2纤维素酶研究进展………………………………………………………………………。3 1.2.1纤维素酶系的组成……………………~………………………………………………3 1.2.2纤维素酶的催化机制…………………………………………………………………一4 1.2.3纤维素酶的结构和功能………………………………………………………………。4 1.2.4纤维素酶基因的克隆……………………………………………………………………8 1.2.5纤维素酶基因的表达……………………………………………………….:…………8 ^‘ 一 1.2.6纤维素的应用………………………………………………一……………………。…9 1.2.6.1纤维素酶在食品业的应用………………………………。:…………………………9 1.2.6.2纤维寨酶在酿造发酵工业上的应用…………………………………………………9 1.2.6.3纤维素酶在饲料业上的应用……………………………………………………….10 1.2.6.4纤维素酶在能源和环境保护上的应用…………………………………………….10 1.3酶的定向进化………………………………………………k………………………….矾■ 1.3.1定向进化中构建突变文库的方法……………………………………………………ll 1.3.1.1易错PCR…………………………………………………………………………….:………………………ll 1.3.1.2随机引物体外重组(Rand伽哪匠mingin响的麒捌nb幽赳’妁………………1l 1.3.13Ⅸ忱改组(硎A shumi呜)……………………j………………..:………………ll 1.3.2定向进化中突变文库筛选的方法……………………………………………………13 13.2.1突变体的分离……矗………………………………………………………………..1; 3 1.3.2.2琼脂板涂布法……………………………………………………………………….1 1.3.2.3微孔板悬浮法………………………………………………………………………。13 1.3.2.4通过酶促反应的特征……………………………………………………………….14 l3.2.5加入底物染色………………………………………………………………………..14 I 1.3.2.6分光光度计和荧光酶标仪检测…………………………………………………….14 1.4分子改造的应用…………………………………………………………………………14 1.4.1改变酶特异性…:……………………………………………………………………….15 1.4.2稳定性和表达能力的改变……………………………………………………………15 1.4.3新的特异性和活性……………………………………………………………………15 1.5纤维素酶的定向进化……………………………………………………………………16 1.6选题的目的意义、研究内容、技术路线………………………………………………18 1.6.1选题的目的意义……………………………。……………………………………….18 8 1.6.2研究内容………………………………………………………………………………l

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