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系列硫酸寡糖的制备及其结构与序列分析 摘 要 卡拉胶(Carrageenan)是存在于红藻细胞壁的一种海洋硫酸半乳聚糖，而 肝素(Heparin)日J]是从动物组织中提取的～种酸性粘多糖，它们均具有抗凝、抗病 毒和抗癌等多种生物活性，是从事糖类药物研究与开发的模型生物分子。本文以 K．卡拉胶和肝素为原料， 分别采用稀酸和肝素酶I对其进行控制降解并获得寡 糖混合物。通过低压凝胶渗透色谱(LPGPC)和强阴离子交换高效液相色谱 (SAX—HPLc)分离技术，获得了25种K一卡拉胶寡糖和15种肝素寡糖，进一 1H 步运用1H．NMR，”C．NMR， 1H．COSY,1H 13C．HMBC等 13C-HMQC和1H 核磁共振波谱技术以及FABMS和ESIMS等质谱分析技术，确定了所得糖链的 结构及序列。。 本文从卡拉胶中共获得了25个寡糖，它们分别为B一卡拉胶二糖，K一 卡拉胶三糖，以及不同硫酸取代度的x一卡拉胶五糖、K一卡拉胶七糖、K一卡 拉胶九糖、K一卡拉胶十一糖、K一卡拉胶十三糖、K一卡拉胶十五糖、K一卡 拉胶十七糖、K一卡拉胶十九糖和K一卡拉胶二十一糖。从肝素中获得了15 个肝素寡糖，分别为不同硫酸化的肝素二糖、肝素四糖、肝素六糖、肝素八糖、 肝素十糖、肝素十二糖、肝素十四糖、肝素十六糖，肝素十八糖和肝素二十糖。 在制备的40个硫酸寡糖中，除了B一卡拉胶二糖外，其它24个K一卡拉胶寡糖 均属于首次报导。通过对K一卡拉胶寡糖结构与序列分析，本文首次提出了稀酸 法水解K一卡拉胶时水解反应只发生于a。(1—3)糖苷键之间，并得到还原端为 4～硫酸半乳糖，非还原端为半乳糖或者4一硫酸半乳糖的系列奇数寡糖。通过 ESIMS以及FACE分析，有力证明了K．卡拉胶分子中不存在分枝点，是一个线 性硫酸半乳聚糖。这些结构确定、序列明确的硫酸寡糖，为进一步从分子水平上 探讨其结构与活性关系提供了基础数据。 关键词：K一卡拉胶寡糖：肝素寡糖，二维分离；制备；结构；序列分析；NMR： FAB／MS；ESI／MS，LPGPC；SAX—HPLC，PAGE。FACE。 their seriessulfated and of oligosaccharides Preparation and structural analysis sequential ABSTRACT kindof extractedfrommarinered sulf-ated-galactan，which alga， Carrageenan，a anitaal kindacidie and extractedfrom tissue，aof heparin，Whieh etc．A11 have activities，such andanticanceracfivifies many as，anticoagulant，antiviral as biomolecularUSedinthe thetwokindsofsulfated model polysaccharidesregarde