荧光原位杂交和子标记在水稻和小麦种质资源研究中的应用.pdfVIP

中文摘要 世器蠛主爨的靛食作物都懿中程采本科作物上，如小发，孤米和水稻。这蟪作 物经长期的人工栽墙和少数基因型品羊申的大面积推广，使这些农作物遗传资源越来 越狡窄，受病虫和非生物逆境的危害越来越严鬣。为了解决世界人口的不断膨脓对 粮食黍娘国益增大的问题，人们正在不断地挖瓣野生物种的伉蘸基因资源，不断魄 通过赢商遗传方法将融究隆的基因在其它物种中避行稻浠。本磷究为了了解禾本科 作渤中两个抗盐桶关慕囡晌诧较遗传警特点，小麦帮水稻写葵辩生稃的杂种遗传学 特点，以便充分桶鬻抗蕴糨关基鬣耦，j、爱与东稻酶辩生梅稀静优良释菔资源t探索 这些後髯燮深鑫奄经麓方法，采用了荧建舔位杂交(FISH)帮其它遗传警方法避褥了 磷究。 ， eDNA建瀣俸搽镑，分裂在承稻、玉米鞠大麦染毯骼主避行荧光缀 ／{、裁蘑RHL 霞蔡交笈瑷：RHL綦驻往于承鞭繁9染媳嚣长罄主：崔运凑串羧浏爨2个擅点，分 雾g彼予嚣2潦色体长鹫转运寒瀛积赘7染色体嵌龌避訾丝粒娥；在大麦中定锭予第 5染琶体长饕庆蠛。按照Gate霸Devos1998每发裴摆Science杂悫巾笨本科基因缒 环形篷，发臻掖定位的纛洙鞠大麦染色抟均包含鸯水糨第9染惑体的嗣源区，基零 符合3个甥耱之溺熬基黧秩垮约共线性。但建l予基戮组大小不尉、基因密度不一致 以及微共线矬缳穹憔程度低，英在各皂染色体位置上襻在偏差。为了进一步证实 PCR方法扩增毖长度一致为 RHL基艘在玉寒鞫大麦中豹枣程，通过Touehdown aconitifolia)克隆 s18bp的带。用生物豢标迎的荧光原使杂交技术，以甄甄(”gna 刘弱PSCS基因假搽针对水攒进行物理{乍图。该探针大约位于水稻第9染色体的短 鹫遥端点处，信母点距羲丝糠的相对距离为S1．79土1．24％。 2，栽培鹣(Oryza 属问育後杂种由陈谋棠博士提供，两个杂种遗过胚抢救获得。通过形态举观察、染 色体计数证实了栽培稻和小粒野生稻的杂种状态，迸～费应糟GISH通道不丽的颜 雹鹤确地显示了Ft杂种中栽培稻和小粒辩生稻来源静染色体。RAPD带黧也清晰罐 搦示杂种中鬃寄凝亲蓊带垒。稻瘟病接释实验发现杂稀获褥了，j、粒野生稻的部分抗 2犍特点，英感瘸特点奔予双亲之阏。栽培稻毅疣粒努生稻杂辩染色体计数发蕊数叠 变化缓大，分为鞭零孛潼凌，一耪是24条，冀一耱是28—47条，螽～释杂释橙株占 绝大部分。有丝分裂过程孛，染色幸零宠燕藩城秀阏嵇俸，熬嚣基露缀舔分分离可辨 解释该袭鼯滋售髂形残的蔽镪，整个遵程癸钕予减数分裂第一次分裂。GISH结暴 遂示缱壤嚣张颜篷褥祭耱串翡亲本染受镕区分开采，丢失静染色俸多半为栽培稻絷 色体，表明疣粒野生稻在杂种细胞中为优势细胞种。RAPD结果也显示杂种之间的 带型差异很大，主要有两种情况，与染色体计数和GISH结果相吻合。结合GISH 和RAPD带型统计，与栽培稻的亲缘关系而言，疣粒野生稻(GG)是--}eo比小粒野生 稻(BBCC)更远缘的物种。 3．多花黑麦草作为一种野生牧草，其有许多小麦所不具有的抗病和其它特异优 良性状。葛台明博士在1997年通过不对称融合获得小麦和多花黑麦草体细胞杂种。 为了使黑麦草的优良性状能最终转移到小麦中，需要用小麦不断地回交以获得回交 后代。体细胞杂种生长势差，生根困难，通过不断地使用生根培养基促进生根，然 后移栽到大田中，利用不同播期的小麦花粉回交杂种，获得回交后代。通过有丝分 裂中期染色体和减数分裂染色体行为观察，发现染色体数目低于预期值，不足42 条，减数分裂过程中形成1—4条单价体，第一次减数分裂后期，有落后染色体出现。 为了了解细胞内染色体构成，GISH显示未发现黑麦草染色体的存在。AFLP结果显 示体细胞杂种中黑麦草遗传物质相当少，只在少数几个杂种中检测到不超过2％的 黑麦草带型，故体细胞杂种为胞质杂种。杂种染色体数目不足42主要是由于组织 培养过程中染色体丢失造成的。y ， ， ? ／ 、／ 。 ／? {／ 关键