菜粉蝶提取物诱黄瓜对炭疽病的抗性及其机理研究.pdf

摘要 本试验测定了37种植物和4种昆虫的80％乙醇提取物诱导黄瓜对炭疽病的抗病 效果。在此基础上构建了菜粉蝶提取物诱导黄瓜抗炭疽病的技术体系，探讨了菜粉蝶 提取物诱导黄瓜抗炭疽病的生理生化机制，并利用DDRT-PcR技术对经菜粉蝶提取 物诱导处理后接种炭疽病菌黄瓜叶片的基因表达进行了分析，对可能与诱导黄瓜抗炭 疽病相关的差异表达基因片段进行回收、克隆和测序，为最终克隆这些基因、研究其 功能奠定基础。主要结果如下： 1．发现了菜粉蝶提取物可诱导黄瓜对黄瓜炭疽病产生局部抗性和系统抗性。 2．建立了适合菜粉蝶提取物免疫诱导黄瓜抗炭疽病的技术体系。 ①最佳诱导方法为叶面喷雾法。 ②菜粉蝶提取物的最佳有效处理浓度为5．0mg／mL。 ③诱导抗性表达的最佳诱导问隔期为3d。 ④有效诱导次数为1次。 ⑤最佳诱导处理时期为黄瓜幼苗二叶一心期。 3．黄瓜叶片经菜粉蝶提取物诱导后各种防御酶活性较空白对照均有所升高，过 4．菜粉蝶提取物诱导处理对黄瓜叶片的脯氨酸、丙二醛含量变化没有明显影响。 5．菜粉蝶提取物诱导处理可直接诱导黄瓜处理叶片或系统叶片积累病程相关蛋 白(PRs)，如再用炭疽病菌挑战接种，PRs在黄瓜植株中的积累会更加明显。 6．用3个锚定引物、26个随机引物的引物组合对经菜粉蝶提取物诱导处理后接 种炭疽病菌和只接种炭疽病菌的黄瓜叶片进行DDRT-PCR扩增，经聚丙烯酰胺凝胶 电泳和银染检测，共获得67条差异表达基因片段．对其进行回收，回收成功率为 99．6％。挑选其中5个差异片段进行克隆、铡序，并进行同源性分析，结果表明D1 关键词：黄瓜；炭疽病；诱导抗病性；技术体系：生化机制：DDRT-PCR InducedResistanceandMechanismofCucumber toAnthracnosePieris Extract by rapae Doctoralcandidate：FeifeiTian JiehuaZhu Supervisor：Professor ProfessorJizhi Jiang Major：Phytopathology Abstract of andfour ofinsectethanolextractswere Thirty．sevenspeciesplant species on surfaceofcucumberleafto the the inducedresistance respectivelyswayed investigate to was ofcucumberanthracnose．11le establishedandthebiochemical techniqueprotocol wasstudiedfor mechanism Pieris extract cucumberanthracnose． rapae inducing against incucumber was with leat,whichinoculate