药用植物内生芽杆菌的多样性和系统发育研究.pdfVIP

摘 要 本论文以50株分离自药用植物的内生芽孢杆菌为研究对象，采用数值分类、 16SrDNA PCR．RFLP、BOX-PCR指纹图谱、16SrDNA序列分析方法对供试菌株 的生物多样性、系统发育进行了系统研究，并测定了供试菌株对几种作物真菌病 原菌的拮抗作用。获得以下主要研究结果： 供试药用植物内生芽孢杆菌具有丰富的表型及遗传多样性。与分类地位已知 rDNA 的典型菌株进行比较，依据表型性状、16S PCR．RFLP及BOX．PCR的聚 类分析，分别将供试菌株分为13、16和27个表观群和遗传群。表观特征表明大 部分菌株具有较高的耐性。在所用的限制性内切酶中，Mspl切割的带谱最丰富， 是反映内生芽孢杆菌16SrDNA序列差异性的最有效的限制性内切酶。 BOX-PCR指纹图谱揭示的遗传多样性更丰富，能区分种内菌株间的遗传差异性。 在数值分类84％相似性水平上位于同一表观群的供试未知菌株大多分布于几个 综合的BOX．PCR群内。总的来说，本研究所采用的表型分群和遗传型分群的结 果在总体趋势上是一致的。 rDNA全序列，并构 依据多样性分析结果，选择代表菌株测定保守基因16S 建系统发育树。结果表明：供试的代表菌株SCAUll与球形芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 的两个亚种，代表菌株SCAU39与巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)的亲缘 rDNA基因全序列分析结果揭示了供试内生芽孢杆菌的系统发育 关系最近。16S 关系。 ． 对玉米弯孢菌(CurvulariaLunata)，小麦禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)， 串珠镰刀菌(Fusarium Turcica)和油 moniliforme)，玉米大斑病菌(Setosphaeria 菜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorum)有较强的拮抗作用。该结果为芽孢杆菌在 生物防治方面的应用奠定了基础。 关键词：药用植物；内生芽孢杆菌；遗传多样性；系统发育；拮抗 Abstract strainsisolated medicinal were bacillus from Fiftyendophytic plants characterizednumerical rDNA PCR—RFLP，BOX-PCR by taxonomy，16S fingerprints and rDNA todescribethe and 16S biological sequence diversityphylogeny．The oftheisolates from weretestedatsame antagonism againstpathogenicfungi crops wereas time．Themainresults follows： A and