麦长管蚜嗅觉相蛋白gqα基因的克隆及真核表达.pdf

摘 要 蚜虫通过直接取食及传播病毒病造成危害，是温带农作物的主要害虫，是农业重大害虫之一。 研究表明，昆虫的嗅觉在处理来自环境的化学信号过程中起着非常重要的作用，从而使昆虫能够 成功地进行寄主定位，寻找配偶、产卵场所等。深入了解蚜虫嗅觉行为，可为研制高效的引诱剂 或杀虫剂提供理论依据，具有重要的理论和实际意义。 该基因的结构特征；并通过构建昆虫杆状病毒表达载体对该基因进行真核表达。取得如下研究结 果： 首次克隆麦长管蚜Gqa全长cDNA序列。根据已报道的动物嗅觉相关蛋白Gqa的氨基酸序列 保守区设计简并引物，以麦长管蚜(Sitobion EF638906，氨基酸序列登陆号：ABR37295)。 利用TOPO及Gateway技术，通过重组反应，构建苜蓿丫纹夜蛾核型多角体杆状病毒 califomicanuclear (Autographa polyhedrosis 毒。转染粉纹夜蛾离体细胞系Tn(Trichoplusia 抗原位点的Gqa融合蛋白V5．His。Gqct在昆虫离体细胞系中成功表达。 本研究为进一步研究蚜虫G蛋白的功能及其信号传导途径奠定了基础，对今后深入开展昆虫 与寄主植物互作机理及植物抗虫机制的研究，开辟防治新途径具有重要的理论和实践意义。 关键词：麦长管蚜，嗅觉，G蛋白0【亚基q类蛋白(Gqct)，克隆，昆虫杆状病毒表达系统 Abstract The isnot the of invariablezonebutoneofthemost to aphid only primarypestcrops importantpest also．For anessentialrolein chemicalfrom insects，olfaction globalagriculture plays processingsignals the tothedetectionof or environment，leading food，reproductivepartners，ovipositionsites，host，prey the oftheolfaction will theoreticalfoundationforthe provide predators．Elucidationsignalling oftheeffectiveattractantand thefreshideasand for development deterrent，and approachespotent controlof Aphid． andPCR Inthis wasclonedRACE fromthe paper,aGqctgene by techniques Englandgrainaphid， were Sitobion recombinant obtained avenae．further,the eukaryotic proteinV5一HisrGqa by expression