光谱分析荧光光谱精要.pptVIP

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  • 2016-02-24 发布于湖北
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光谱分析荧光光谱精要.ppt

核酸分子荧光探针及核酸染色 沿核酸的螺旋方向看,双螺旋表面有两个沟槽,一个宽槽和一个窄槽,这两个沟槽使碱基外露,为分子探针或其他分子与碱基作用提供了空间。 核酸染色剂及荧光探针的应用 溶液中核酸的定量测定 单分子核酸检测 核酸的凝胶染色体电泳分离检测 在荧光共振能量转移(FRET)技术中的应用 DNA序列分析 DNA序列分析中的荧光染料:在电泳分离荧光法检测DNA 序列分析中,通常分四组(A,C,G,T体系)进行,如果用 四种不同的荧光染料为探针,标记一个共同的引物,分别 用在 A、C、G、T四个反应体系中,等于用不同的探针 专一地标记了不同的碱基,利用各荧光探针光谱的差别 便可把不同的碱基区分开,因此选择一组四种合适的染料 成为关键, 它们应满足以下条件: (1)吸收和发射光谱应在可见光区,以降低散射和荧光背景; (2)各染料的荧光发射波长因该有明显不同,以便区分不同染料; (3)应有很强的荧光强度,以获得高灵敏度; (4)不严重干扰引物的杂交作用,使其不影响测序反应效率; (5)染料的存在不严重改变电泳谱图。 表

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