小麦抗叶锈基因r35成株抗性的差异表达研究.pdfVIP

摘要 小麦抗叶锈基因Lr35最初来源于斯卑尔脱小麦(Triticum 上，该基因与Sr39紧密连锁，其抗性在二叶期开始表达，六叶期后完全表达，是一 个应用潜力很大的抗病基因。因此开展Lr35成株抗性基因的表达研究对于了解小麦 的抗病机制、克隆抗病基因、合理利用该基因均具有重要的意义。 Lr35不同叶期，接菌后不同时间内的基因表达差异。获得如下结果： 环是将小麦cDNA Imin，循环23次；最后一个循环完成后，再72℃延伸2min。 的样品进行筛选，获得到6对能扩增出Lr35不同叶期与对照样品之间的差异表达量 3．研究发现小麦抗叶锈基因Lr35的差异表达方式分两种：一种表达方式是基因 达量的增加。另一种表达方式是出现特异性条带，引物组合包括E．TG／M—CTC， E．TG／M．CAG，E—TG／M—CAC， 特异性条带。 4．将所得到的68条差异表达的条带回收扩增，回扩出33条差异条带，回扩效 blot验证，共得到7 率为49％。将回扩得到的33个差异条带样品进行反向Northern blot， 证明为小麦抗叶锈基因Lr35表达的特定基因片断，该研究成果为进一步进行抗病基因 的克隆奠定了基础。 blot PlantResistance Differential ofAdult Gene Expression Rust Lr35toWheatLeaf Master Chen candidate：Yunfang Major：Molecularplantpathology Liu Daqun Supervisor：Professor Professor WengxiangYang Abstract WheatLeafrust anTriticum was resistanceLr35from transfered gene speltoides to thebreedwheat rmonococcum．Thewas Marquisthrough diploid backcrossing、vim gene thewheatstemrustresistance onchromosome2B．It linkswith Sr39． mapped cl