盾壳霉t-dn标记插入突变体库的构建及其质量评估.pdfVIP

华中农业大学2004属倾卜论殳 盾壳霉T-DNA标记插入突变体库的构建及其质量评估 摘要 minitans)是核盘菌(Sclerotiniasclerotirium)的重寄牛 盾壳霉(Coniothyrium 真菌，在世界范围内广泛存在，是作物菌核病的一种重要生防菌。本论文对农朴菌 介导转化(Agrobacterium tumefacien．mediated 条件进行了研究，并对构建的T-DNA标记插入体库进行了评价。 构建了用于转化的双元载体，即将来自构巢曲霉(Aspergillusnidulans)的trpC 35S启动了．获得 启动子替代用于转化植物的双元载体pCAMBIAl301中的CaMV 化盾壳霉具有较高的转化效率。 将盾壳霉分生孢子和含有质粒pTFCM的农杆菌混匀，涂在紧贴于CO—IM培养 基的玻璃纸上培养2天，然后将玻璃纸转至灭菌培养皿中，用含有60肛g／mL潮霉素 和750 E生长出的盾壳霉菌落挑至含60lag／mL潮