最新抗原抗体反应及应用.ppt
第七章 抗原抗体反应及应用 第1节 抗体的制备与应用 抗血清:指抗原人工免疫实验动物,获得含特异性抗体的血清。 多克隆抗体(PAb):多个抗原决定簇免疫机体所产生的多种抗体的混合物。 单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb):由单一B细胞克隆合成并分泌的一种组成均一的免疫球蛋白分子,简称单抗。 一、抗血清的制备 1、免疫动物 抗原 佐剂 免疫动物 2、抗血清的纯化与保存 采血 纯化与保存 3、抗血清的鉴定 效价 亲和力 抗原的准备 病毒、细菌、蛋白质或半抗原 半抗原与载体偶联制备完全抗原 佐剂的使用:佐剂与抗原按1:1比例混合乳化 弗氏佐剂 动物的选择 抗原与免疫动物的种属差异越远越好。 对蛋白质抗原,大部分动物皆适合,常用的是山羊和家兔;甾体激素免疫多用家兔;酶类免疫多用豚鼠。 抗血清量的需要:大动物如马、骡等可获得大量血清(一头成年马反复采血可获得10000ml以上的抗血清);但有时抗体需要量不多,选用家兔或豚鼠即可。 免疫途径 一般采用多点注射,一只动物注射总数约为8~10点,包括足掌及肘窝淋巴结周围,背部两侧、颌下、耳后等处皮内或皮下,免疫效果较好;亦有肌肉、腹腔、静脉注射途径。
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