最新在限制氮异养条件下补料分批培养富油新绿藻提高脂质和碳水化合物的积累.ppt

研究目的 研究意义 研究方案 研究结果 创新性 基本概念 Neochloris oleoabundans是一种藻类植物的拉丁名，它是属于绿藻纲的一种微藻，可以翻译成“富油新绿藻”，它含脂量很高（看命名就知道了，oleo是油的意思，abundans是多的意思），所以有希望用于生物燃料和化妆品的生产，也可以用作淡水贻贝养殖的饲料。 基本概念 fed-batch:补料分批培养是指在分批培养过程中补入新鲜的料液,以克服营养不足而导致的发酵过早结束的缺点. 在此过程中只有料液的加入没有料液的取出,所以发酵结束时发酵液体积比发酵开始时有所增加.在工厂的实际生产中采用这种方法很多. u 比生长速率：每小时单位质量的菌体所增加的菌体量称为菌体比生长速率。它是表征微生物生长速率的一个参数，也是发酵动力学中的一个重要参数 在异养补料分批培养条件下，限制氮对富油新绿藻生长速率和储备代谢产物的影响 研究意义 富油新绿藻可以在异养或者自养条件下培养，目前以葡萄糖作为碳源异养已经产生高细胞浓度和高脂质含量。 在限制氮，异养条件下，在补料分批培养系统中培养富油新绿藻，提高了脂质和碳水化合物的积累。用来生产再生柴油和喷气燃料 研究方案 N. oleoabundans UTEX 1185在100ml加入了10g L-1葡萄糖的BBM培养基中暗培养，摇床培养 接种至5L的生物反应器中，其中3L　BBM，Ｐｈ　７.０摇床培养，通气１L/ｍｉｎ 接种至40L含过量葡萄糖的生物反应器中，20 L BBM，通气20L/min 研究方案 第一阶段是无碳或者氮限定的培养，细胞生长速率u 0.045,主要的细胞质成分是蛋白质（44%，DCW）,4天 在一个含过量葡萄糖的40L生物反应器中： 第二阶段是补料分批阶段，两种不同指数期硝酸盐补给。 结果显示限定氮对u(0.042)有20%的降低作用，对细胞组成物影响更大，促进脂肪和碳水化合物的积累 第三阶段是后补料分批阶段，细胞在氮饥饿和过量葡萄糖条件下培养，当葡萄糖被耗尽时, 细胞含有53.8%脂质，细胞量20.9gDCW L-1,生物量 脂质 碳水化合物产率分别是1900.1020.500mgL-1 day-1.这是目前报道中产率最高的 补料分批阶段 硝酸盐流动速率 比生长率×容积×生物量×exp(比生长率×t) 进口处底物硝酸盐浓度×硝酸盐消耗速率 补料分批阶段硝酸盐浓度保持稳定，接近零。使硝酸盐的补给等于消耗 结论 1.在限定氮源和过量葡萄糖培养条件下，指数补料分批培养能令我们获得高浓度的富油新绿藻。微藻在两种不同生长速率条件下积累储备代谢物量也有区别 2.N饥饿和过量葡萄糖培养条件下积累储备代谢物，N限定浓度的小变化可引起储备代谢物配比大变化 3.指数补料分批培养方法是一个获得高产率细胞量和脂质含量的成功的方法。这个实验中所获得的量是目前富油新绿藻自养，异养，混合培养方式中最大的 3.5 微藻能量储备与酵母产乙醇比较 将1500g葡萄糖转化为乙醇得到649.27MJm-3. 微藻总生物量（脂质，蛋白质，碳水化合物）产能得到662.5MJm-3 产能与酵母相似，其用来生产生物能源并无太大优势。可用在生产高价值物质（多不饱和脂肪酸，类胡萝卜素，藻胆蛋白）时采用异养模式 * 富油新绿藻 在限制氮，异养条件下补料分批培养富油新绿藻提高脂质和碳水化合物的积累 研究目的 * * 分批 C/N=278 氮、葡萄糖充足 1.4-1.51gDCW/L 45gG/L 补料分批 后补料分批 * * 28% = 2.5 1.2 2.04 * * 44% 27.5%↓ 8.3%↑ 19.3%↑ 17.5% 17.4% 44.6% 53.8% 38.1% 26.9% * * * * * * 生产高价值物质（多不饱和脂肪酸，类胡萝卜素，藻胆蛋白）时采用异养模式 * * 富油新绿藻在氮限制的异养分批补料培养条件下生长； 指数喂养方法得到高细胞浓度量； 氮限制后补料分批培养促进脂质的积累； 氮限制导致μ生长速率20%的下降，增加了脂质和糖类的产量； 80%的μmax增加饱和脂肪酸的产量。 创新性 * 谢谢！