高粱硅转运蛋白bnip2-1基因的克隆及其表达载体的构建.pdfVIP

摘要 硅是植物生长的有益元素，它对提高作物的产量和抗逆性具有重要作用。最近的研究证明， bicolor)比水稻具有更强的抗缺硅能力，推测它的质膜上具有高 旱地禾本科植物高粱(Sorghum 亲和性硅转运蛋白；另外，高粱之所以具有较强的抗早能力，与硅在根系内皮层和叶片表皮细胞 中的大量积累有关。因此为了促进植物对低浓度硅的吸收并提高其抗旱能力，人们迫切需要了解 高粱根和叶片控制硅的吸收与运输的分子机制。本论文首次报道了高粱硅转运蛋白基因SbNlP2-1 的克隆及其异源表达系统载体的构建。主要研究结论妞下： l府粱硅转运蛋白基因的克隆 我们运用电子克隆和反转录PCR方法，从高粱组织中克隆到与水稻硅转运蛋白高度同源的 基因，命名为SbNIP2．J。这个基因序列已彼提交到美国GenBank数据库，得到确认并指定序列 号为：EF373651。生物信息学软件分析表明高粱硅转运蛋白含有297个氨基酸，其中包含了6个 白NIP2．1与水稻硅运转蛋白NIP2一I的氮基酸序列，发现它ff、j之问的一致性高达80．z7％。 2．异源表达载体的构建 23346c中。经卤落PCR及酶切验证，确定重组质粒 起来，将重组质粒转化至酵母Saccharomyces 已被导入；拟南芥表达载体是用pa蝴B认1300+，启动子为35S。将重组质粒转化至农杆菌 Gv3101中，经质粒PCR验证，确定重组质粒已被导入。 关键词：高粱，硅，硅转运蛋白基因。表达载体 Abstract Siliconhas effectsoll and resistanceloboth beneficial plantgrowthgrainyield。conferring biotic andabioticstresscs．Recentresearchesshowedthat bicolor)asa land sorghum(Sorghumdry wasmoreresistanttosilicon than itis that rice，and graminaceousplant deficiency predictedhigh silicon existin membraneof is that sorghum．Furthermore．it affinity transportersmay plasma reported of the resistance wasrelatedtoabundantsiliconaccumulationinendodermisof hi曲dmughl sorghum rootsand ofleaves．Inordertoincreasethe of toabsorblowconcentrationof epidermis abilityplants siliconandenhance is torevealthemolecularmechanism droughtresistance,it important responsible forsilicon andaccumulationin wasthefirsttimeto the uptake sorghum．Thispaper reportsorghum