半滑舌鳎cynglossus semilaevis雌性化和三倍体的人工诱导研究.pdfVIP

摘要 摘要 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis )俗称鳎米、牛舌头，主要分布在我国黄渤海海域，是 我国特有的重要名贵经济鱼类。半滑舌鳎雌雄个体差异很大，雌性生长速度比雄性快2～3 倍。因此，实现雌性单性化养殖，对于提高半滑舌鳎的养殖产量和经济效益具有重要意义。 近年，我国水产科学研究者对半滑舌鳎的生物学特征、人工繁育等方面进行了大量研究， 已经突破了人工繁殖难关。但是，关于半滑舌鳎的全雌化诱导和三倍体人工诱导等研究， 迄今未见报道。 本研究利用不同浓度的 17β-雌二醇浸泡半滑舌鳎鱼苗诱导性转化，观察了半滑舌鳎的 性分化过程和激素对性分化的影响，分析了激素诱导对半滑舌鳎的性比、生长速度和成活 率的影响。本研究还探索了利用雌核发育二倍体的最佳诱导参数诱导三倍体的方法，观察 了三倍体的胚胎发育特点，利用流式细胞仪检测了染色体加倍的有效性。各项试验均取得 了良好的效果，为半滑舌鳎全雌化和三倍体诱导研究提供了重要的基础数据和有益经验。 本研究取得的各项结果均为国内外首次报道。 本研究取得主要试验结果如下： ⑴ 半滑舌鳎属于雌雄异体分化型鱼类，卵巢分化比精巢早。卵巢分化的解剖学标志主 要是卵巢腔的形成，最早出现于孵化后65 天；精巢分化的解剖学标志主要是输精管和精小 叶的形成，出现于孵化后70 天。性分化的细胞学标志主要是性原细胞减数分裂。卵原细胞 减数分裂开始于孵化后 100 天后；精原细胞减数分裂则开始于孵化后90 天左右。 ⑵ 在激素诱导性转化研究中，1µg/L、3µg/L、10µg/L和30µg/L 的17β-雌二醇处理组的 雌性比率分别为74%、82%、88%和97% ，与对照组（26% ）相比，处理组的雌性比率显著 提高（P ﹤0.01 ）；乙醇组的雌性比率为36% ，与对照组相比差异不显著（P ﹥0.05 ）。由此结 果可以看出，17β-雌二醇可促使半滑舌鳎卵巢分化，却抑制精巢分化。激素处理组未发现 雌雄间性及不育现象。雌二醇对半滑舌鳎的早期生长影响不大，与对照组相比没有显著差 异（P ﹥0.05 ）；雌二醇处理对半滑舌鳎的死亡率没有明显影响（P ﹥0.05 ）。 (3) 对半滑舌鳎雌核发育冷休克处理条件地优化结果表明：受精卵在正常孵化水温 22±0.5 ℃培养时，雌核发育的最佳条件是：受精后3min ，用5±0.5℃的海水冷休克处理20min 。 参照诱导雌核发育二倍体的条件，用冷休克法诱导出半滑舌鳎三倍体，流式细胞仪检测染 色体加倍的有效性。 (4) 对半滑舌鳎三倍体的胚胎发育观察结果表明，普通二倍体胚胎发育最快，雌核发育 二倍体次之，单倍体发育最慢，三倍体胚胎发育速度介于雌核发育二倍体和单倍体之间。 破膜后的单倍体脊柱弯曲，器官分化不全，畸形率高。三倍体和雌核发育二倍体与普通二 V 东北农业大学农学硕士论文 倍体半滑舌鳎的发育时序基本相同，除三倍体和雌核发育二倍体各阶段受冷休克影响发育 较慢外，发育特征与发育分期没有明显差别。 关键词： 半滑舌鳎；性分化；17β－雌二醇；三倍体诱导；胚胎发育 VI ABSTRACT All-female and Triploid populations induction of Half-smooth tongue-sole (Cynoglossus semilaevis) Abstract Half-smooth tongue-sole (Cynoglossus semilaevis) females growed bigger and mature later than males, it was reported that females growed 2～3 times faster than males, in other word