利用cdna-flp技术筛选与羊毛细度相关的分子标记.pdfVIP

摘 要 羊毛细度的改良一直是细毛羊育种的重要目标之一，新吉细毛羊是我国具有很好羊 毛品质的细毛羊，其主体为细型，部分个体达到了超细型，为了初步了解造成这种表型 差异的遗传本质，进而能筛选出超细型细毛羊的分子标记，本研究利用AFLP技术对超 细型细毛羊的基因组进行检测，利用cDNA．AFLP技术对羊毛细度极端个体(超细型和 细型)皮肤组织的mRNA进行了差异基因的比较分析，结果如下： I和EcoRI双酶切， 1．经过大量摸索，建立了一套银染AFLP技术体系。采用Taq 对引物获得的标记数在29～50之间，研究结果表明：AFLP技术适合检测绵羊的遗传多 态性，新吉超细型细毛羊相似系数AFLP研究结果为O．914--O．982。 2．依据所建立的AFLP技术体系，共使用64对选择性引物组合对羊毛细度极端个 差异片段，其中16条在超细型细毛羊的表达量比细毛羊上高，其它在细毛羊上的表达 量的比在超细型细毛羊上的高。成功克隆测序8条差异片段，得到的序列与Gerd3ank 分别与羊的膜联蛋白的mRNA(annexin nuclear 2)，牛的不均一核蛋白(heterogeneous ribonucleoprotein 白(calpastatin)的mRNA高度同源。 本研究有助于对超细型，细型细毛羊差异形成原因的分子基础的认识，为羊毛基因 组的研究增加了新的资料。 关键词：超细型细毛羊，AFLP，cDNA．AFLP，基因表达 ⅡI Abstract finenessis oneofthe forfine breeding．XinJi To wool qualityalways importantgoals sheep Improve ofwoolarefine woolin main wool， fine．wooliswhichcail quality China,thetypes sheep productgood to the factors thedifference w001．Inorderresearch otherindividualsarethe genetic causing super．fine wereusedto DNA， wool and finewool analysisgenomic betweenfine sheepsuper sheep，AFLPtechniques two usedto themRNAs statusinskinbetween eDNA．AFLP were display expression techniques wool and wool mainresultsof whichwerethefine