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南宁市郊奶牛乳腺炎相关研究及其对繁殖性能的影响 摘要 奶牛乳腺炎是导致奶牛业经济损失最严重的疾病之一。本文对南宁市 郊奶牛乳腺炎的发病情况、致病菌的流行状况、金黄色葡萄球菌毒性基因 的分布、隐性乳腺炎乳汁酶类诊断、治疗乳腺炎中草药制剂组方的确定、 乳腺炎疫苗的研制和效果评价以及临床乳腺炎对繁殖性能的影响等方面进 行了探索和研究，取得结果如下： ’ 查，平均瞎乳头的奶牛占11．5％，平均瞎乳头率3．7％，临床乳腺炎奶牛平 均发病率8．7％，乳区平均发病率3．7％，隐性乳腺炎奶牛平均发病率48．8％， 乳区平均发病率19％，此外，临床乳腺炎和隐性乳腺炎的发病率随着胎次 的增加而升高。临床乳腺炎和隐性乳腺炎乳汁致病菌检出率分别为96％和 34％，临床乳腺炎的主要致病菌是金黄色葡萄球菌(29．5％)，大肠杆菌 实验所用的大多数抗生素和乳炎消对致病性细菌都比较敏感，分离的大肠 杆菌和金黄色葡萄球菌的毒性最强，致病率分别为61％和54％。 。 (2)对39株细菌的23SrRNA序列进行检测，全部确定为金黄色葡萄 因，金黄色葡萄球菌携带一种以上毒力基因的现象较为普遍，提示菌株间 毒力基因连锁流行的情况较普遍，并且毒性基因的流行病学具有一定的地 域性。 (3)从奶牛产后两周到产后十周采集的124个乳样，同时进行细菌学 检测和上海隐性乳腺炎检测(SMT)，均为阳性结果的乳汁确定为隐性乳腺 乳汁中的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性显著低于正常乳汁，SCM乳汁 的活性可以作为奶牛隐性乳腺炎诊断的一种方法，并且在一定程度上为探 明奶牛乳腺炎的发病机理提供依据。 (4)金黄色葡萄球菌对连翘和黄连极度敏感，大肠杆菌对乌梅高度敏 感。诃子、黄连对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强，最低抑菌浓度(MIC) 达到8mg／mL，乌梅和黄连对大肠杆菌的抑制作用最强，MIC达到16 mg／mL。通过正交设计，连翘、诃子、乌梅和黄连均能明显提高对金黄色 葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用，可以作为奶牛乳腺炎中草药组方的主要 成分。该组方对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的MIC分别为8 mg／mL和16 mg／mL。 (5)所研制的两种金黄色葡萄球菌疫苗对小白鼠的攻毒保护率达到 H 60％以上。根据常规间接ELISA方法，通过反应体系的优化，确定了最佳 反应条件，初步建立了间接ELISA检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌抗体的 准曲线和回归方程，回归方程计算的预测效价和实际效价基本一致。接种 疫苗后714天，奶牛血清的特异性抗体效价逐渐升高，疫苗1组奶牛于 接种后14天达到最高峰(1：2995)，随后逐渐缓慢下降；疫苗2组奶牛于 接种后21天达到最高峰(1：2062)，随后逐渐缓慢下降。直至实验结束(接 种疫苗后第150天)，两个实验组奶牛血清的特异性抗体效价仍然高于阴阳 临界值。 一．‘ (6)对南宁市郊某规模化奶牛场152头2-4胎次的经产奶牛产后进 行临床乳腺炎的发病时间和繁殖指标的调查，包括首次配种天数、配种次 数、首次配种怀孕率、空怀期、产后70天内怀孕率、流产率。产后至怀孕 之间发生临床乳腺炎奶牛的首次配种天数和空怀期均极显著多于对照组奶 显著低于对照组奶牛(PO．05)，产后70天内怀孕率低于对照组奶牛(P 生临床乳腺炎奶牛的首次配种天数和空怀期极显著多于对照组奶牛(P 怀孕之间发生临床乳腺炎奶牛的首次配种天数和空怀期极显著多于对照组 率显著低于对照组奶牛(P0．05)。结论：奶牛产后至怀孕之间发生临床乳 腺炎对繁殖性能具有严重的负面影响。 IlI 关键词：奶牛乳腺炎 毒性基因 乳汁酶类 中草药 疫苗 繁殖 性能 IV THECOWSMASTITIS RELA