若干猪精子功能因克隆及其mrna在生殖道和成熟精子中的表达特性研究.pdf

宋成义：若干猪精子功能基因克隆及其mRNA在生殖道和成熟精子中的表达特性研究 若干猪精子功能基因克隆及其mRNA 在生殖道和成熟精子中的表达特性研究 摘要 精子功能基因家族在梅山公母猪生殖道和成熟精子中的时空表达特性，这些功能 (SPMI)的在成熟精子中mRNA表达水平与精子活力、获能和顶体反应的关联。 主要研究结果如下： 及99bp．5’非编码区和184bp 3 1599bp开放阅读框及333bp5’非编码区和122bp 5’非编码区和19 3’非编码区； bp 长为1340bp，含1200bp开放阅读框及121bp 5’非编码区和 3 402bp 8 扬州大学博士论文 的氨基酸序列在N和C端保守性相对较低，而中间序列比较保守。结构域预测表 螺旋结构(coiled 端。 Catsper3基因的表达在150日龄时有显著下降(Po．05)。 and 3．获得了ZPBP2基因的两个拼接形式的mRNA序列(1488bp1269bp)。两 3’ 宋成义：若干猪精子功能基因克隆及其mRNA在生殖道和成熟精子中的表达特性研究 9 SMART程序还发现了一个类免疫球蛋白结构域，两个重叠的类表皮生长因子结构 域，其中两个类表皮生长因子结构域位于羧基末端半胱氨酸富集区内。 在精囊腺、附睾尾和睾丸表达，但在睾丸中表达丰度最高。此外在精囊腺中检测 基因的表达，但一直至60日龄保持较低水平，至90时表达水平有显著升高 (P0．05)，并保持持续升高到150日龄(P0．05)。 达。AQNl基因除在附睾体、输卵管和卵巢组织中没有表达，在其它生殖道组织中 均有表达。AQN3基因除在附睾体、睾丸和卵巢中没有表达外，在其它生殖道组织 中均有表达。该家族的所有基因在精囊腺中的表达强度最高，前列腺和附睾体中 的表达强度中等，而在附睾体和睾丸中表达强度很弱或不表达，但AWN基因在睾 丸组织中有较高的表达水平。精子黏附蛋白基因家族发育性表达分析表明：在精 因在仔猪出生后即有较高的表达，60日龄时表达水平达到高峰，60日龄至150日龄 10 扬州大学博士论文 表达水平很低，然后在30日龄时显著提高，在60、90和150日龄时分别有显著提高 90和150日龄时维持在较高水平，但不同日龄间无显著差异。 在整个附睾(头、体和尾)都有较强的表达信号，而在精囊腺和前列腺中的表达 信号中等。CRISP2基因在生殖道的表达更加广泛，其中在睾丸的表达丰度最高， 附睾尾和输卵管的表达中等，在前列腺、尿道球腺，附睾体，子宫颈和输卵管的 表达较弱，在精囊腺、子宫角和卵巢没有表达。CRISP3在前列腺和尿道球腺高水 平表达，在睾丸和卵巢有少量表达。ELSPBPl基因在附睾尾高丰度表达，在附睾 体表达水平中等，在精囊腺和前列腺中表达较弱。pBl基因在整个生殖器官有广泛 的表达，在精囊腺、前列腺、附睾头、附睾体、睾丸和卵巢有高丰度的表达，并 在尿道球腺、附睾尾及子宫颈有少量表达。CRISP和Fn．2基因在公猪生殖道组织的 发育性表达分析表明，总体上，CRISP和Fn．2基因呈现了不同发育性表达特点。 著提高(P0．05)，然后保持直到150日龄。 表达丰度最高，其次是尿道球腺，再次是子宫角，在前列腺，子宫颈和卵巢中的 表达较弱。发育性表达分析表明，SPMI基因在精囊腺和尿道球腺中的表达呈现相 似的规律，SPMI基因在两个组织的表达都在初生时即启动，然后随着日龄的增 宋成义：若干猪精子功能基冈克隆