鸡肝脏和骨骼肌irna表达和功能研究.pdf

摘要 的非编码的约22个核苷酸长度的单链RNA分子，是基因表达的重要调控因子，其对肝 脏代谢和骨骼肌发育发挥了重要的作用。本研究以鸡肝脏和骨骼肌miRNA为研究对象， 对其进行了一系列的表达和功能研究，主要研究结果如下： 运用靶基因预测软件预测出364个miR-122的靶基因，挑选其中与肝脏代谢相关的预测 在肝脏生长发育过程中上调，在鸡肝细胞离体培养过程中下调，5个基因在肝脏生长发育 在离体和培养过程中分别下调和上调，PKM2不受影响。体外双荧光素酶报告系统和靶位 点突变实验证明5个基因及预测靶位点分别是miR．122的靶基因和靶位点，通过鸡细胞 控作用。 中64个基因表达显著上调，59个基因表达显著下调。GO分析显示21个基因参与鸡肝脏 代谢过程，表明miR-122可能通过影响这些基因而调控鸡肝脏代谢。通过比较测序及实 下调，而ARCNl不受影响，Western 说明miR-122可调控这些靶基因。 TGF．D3可能影响这些基因进而调控肝脏代谢。 运用靶基因预测软件预测出54个miR．126的靶基因，挑选其中与肝脏代谢相关的预测靶 离体培养过程中下调，Spredl表达不受影响。体外双荧光素酶报告系统和靶位点突变实 在鸡肝脏代谢中发挥调控作用。 上调，27个表达显著下调，这些miRNA可能参与鸡肝脏代谢过程。 运用靶基因预测软件预测出247个miR-la的靶基因，挑选其中与肌肉发育相关的预测靶 可能通过调控这几个基因在鸡骨骼肌发育中发挥调控作用。 高。运用靶基因预测软件预测出287个miR．133a的靶基因，挑选其中与发育相关的预测 BIRC5表达不受影响。体外双荧光素酶报告系统和靶位点突变实验证明BIRC5及预测靶 肌发育中发挥调控作用。 关键词：鸡；肝脏IIliI斟A；骨骼肌miRNA；表达；功能 ‘ 一 he andandfunctiontunctlonofomlmiRNAsKNinchi(；kenclalcl(enliv(liverand expression skeletalmuscle Abstract Livermetabolismandskeletalmuscle aretwo developmentimportantbiologicalprocesses in aclassofsmall RNAsabout22nuleotidesin chicken．microRNAs(miRNAs)arenon·coding with length，whichregulate by the3’untranslated geneexpressioninteracting mRNA．miRNAs rolesinlivermetabolismandskeletalmuscle target playimportant thecurrent seriesof andfunctionstudiesaboutthe development．Instudy,a expression miRNAsinchickenliverandskeletalmusclewere asfollows： conducted。刀把mainresultsare invarioustissuesWasdetectedreal-time (1)miR-122expression using quantitative resultshowedmiR-122Was in miRNA RT-PCR(qRT-PCR)．The highlyexpr