问号钩端螺旋体属特异性LipL41s抗原膜定位及其患者血清抗体检测.pdfVIP

·776· 实验室研究· 问号钩端螺旋体属特异性LipL41s抗原膜定位 及其患者血清抗体检测 胡野 郭宗琪 孙百莉 杨平 严杰 【摘要】 目的确定问号钩端螺旋体(钩体)属特异性脂蛋白抗原LipL41s膜定位及其自然抗体 应答情况和抗体类型。方法 采用显微镜凝集试验(MAT)检测四川地区钩体病患者血清标本。 IPTG诱导重组原核系统表达目的蛋白rLipL41／1和rLipL41／2，Ni—NTA亲和层析法提纯目的重组表 达产物。采用westemblot检测感染不同血清群问号钩体病患者血清与rLipL4ls的免疫反应性。采 用胶体金免疫电镜技术，对LipL41s进行膜定位。建立基于rLipL41s的ELISA，检测钩体病患者血清 中特异性抗体水平及其类型。结果黄疸出血群是四川地区最主要的优势钩体血清群。不同血清群 问号钩体病患者血清均能有效识别LipL41s。LipL41s是位于钩体外膜表面的蛋白分子。156例 MAT阳性钩体病患者血清标本中，rLipL41／1和rLipL41／2特异性IgM阳性率分别为84．6％～ 87．8％和78．2％～83．3％，特异性IgG阳性率分别为69．2％～81．4％和75．0％～80．1％。结论 “pL41s是钩体表面蛋白抗原。自然感染钩体时，LipL41／1和LipL41／2可诱导机体产生IgM和IgG两 类血清抗体，且两者之间有广泛的抗原交叉反应。rLipL41／1和r“pL41／2可作为研制通用型钩体基 因工程疫苗和检测试剂盒的候选抗原。 【关键词】钩端螺旋体；基因，LipL41s；重组表达；抗原定位；免疫应答 onthe10cationofmembraneanddetectiOnof intheseraof Study antibOdy genus-specificantigenLipL41s in with HU patientsL印fospfminfer，卿一s K+，GUOZ0，29-qi，SUNB丑i一矗，y一^晒Pi，zg，yAN^P． +MedifⅡZSc^00Z 0‘厂Ji咒^“。P，‘o如ssio咒ⅡZ亿五咒叼“8(石￡三巨gP，．，i咒^越n321000，China 国rr∞加，z威咒g以甜￡^or：yAN．，钯，Email：Me0一bp@zju．edu．cn thelocation Todetemine onouter andnatural 【Abstract】Objective envelope antibodyresponse and of in with typesgenus—specificlipoproteinantigenLipL41spatientsLPp￡05户irni圮f已r，‘(喀u起s．】Ⅵethods to test(MAT)wasused examine serum from MicrOScopeagglutination 1eptospimsispatients’ samples S【chuan was the area，China．Ni—NTA toextract recombinant affinitychromatographyperformed target and that underinducementof blot was IPTG．western rLipL41／1rLipL41／2p