对虾免疫反应抗病毒功能比较以及细菌人工染色体克隆构建初探.pdf

摘 要 对虾白斑综合症病毒(WhiteSyndromicVirus，WSSV)，是一种 Spot 严重危害对虾养殖业的主要病原，至今仍无有效的防治方法。为进一步 了解对虾的先天性免疫机制，本研究比较了细胞免疫中的凋亡和吞噬以 及体液免疫中的酚氧化酶原系统在对虾WSSV侵染中起的作用，为对虾 病毒有效的防治方法的建立提供了理论依据；为研究对虾免疫相关基因 的功能与调控，进一步揭示抗病毒免疫的分子机理，本研究对对虾细菌 人工染色体克隆的构建进行了初探，为对虾功能基因组学的研究提供了 新的手段。 为比较凋亡、吞噬和酚氧化酶原系统三种免疫反应在抗病毒侵染中 所起的作用，本研究用cytochalasin 种特异的抑制剂分别对凋亡、吞噬和酚氧化酶活力进行活体抑制，通过 对感染对虾死亡率及其体内WSSV拷贝数的跟踪检测，发现凋亡和吞噬 的抗病毒活性要高于酚氧化酶系统，说明对无脊椎动物的病毒防御来说， 细胞免疫比体液免疫所起的作用更大。 通过大片段对虾基因组DNA提取方法的优化、二次片段选择脉冲场 电泳条件改进和DNA电沈脱方法的比较，本研究成功回收得到完整性和 浓度较高酶切基因组DNA，为构建对虾细菌人工