多倍体构建及基因组重排对提高酿酒酵母乙醇产量的研究.pdf

中文摘要 随着人们对矿物燃料造成的环境负面影响认识的加深，以及对石油资源日 趋枯竭的担忧，开发可再生燃料已成为当今发展趋势。燃料乙醇作为一种清洁 可再生的生物能源已在许多国家生产和使用。目前燃料乙醇的生产主要是通过 酿酒酵母对淀粉质或糖质原料的发酵来实现。浓醪发酵是一种在高糖浓度下的 新兴乙醇发酵方法，提高了乙醇浓度和发酵的速度，从而节约了能耗，提高了 设备利用率。但浓醪发酵条件下高渗透压和高乙醇浓度对菌株的生长和发酵不 利，因而提高菌株在该条件下的发酵能力很有意义。本研究从工业菌株CNl出 发，使用两种方法对其改造来提高浓醪发酵条件下的发酵能力：一是构建多倍 体菌株并考察不同染色体组倍数的酿酒酵母系列菌株发酵能力差异；二是使用 EMS诱变及基因组重排的方法筛选发酵能力提高的菌株。 因表达，得到交配型为MATa／a和MATa／a的双倍体菌株。对CNl拆孢得到交配 型为MATa和MATa单倍体菌株。使不同交配型酵母发生融合，可得到三倍体和 四倍体菌株。发酵实验显示，尽管多倍体菌株的乙醇耐受力提高，但耗糖速度 和乙醇产量低于二倍体。 本研究在确定甲基磺酸乙酯(EMS)最佳诱变剂量的基础上，对双倍体酵 母菌株CNl进行诱变。并利用酵母的生孢和融合，实现基因的分离和重排。通 过富集、初筛