东北黑蜂（Apis mellifera ssp.）亲缘关系的分析.pdfVIP

中国农业科学 2009,42(4):1494-1502 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.04.047 东北黑蜂（Apis mellifera ssp.）亲缘关系的分析 彭文君，罗其花，安建东，黄家兴，郭 军 （中国农业科学院蜜蜂研究所，北京 100093 ） 摘要： 【目的】从分子水平揭示东北黑蜂与欧洲黑蜂、意大利蜜蜂、卡尼鄂拉蜂、喀尔巴阡蜂、安拉托利亚 蜂、高加索蜂以及非洲类型的西方蜜蜂的亲缘关系，为东北黑蜂分类地位的正确认识及其合理保护提供参考。【方 法】对来自东北黑蜂国家级自然保护区内 9 个乡镇的东北黑蜂与上述西方蜜蜂的线粒体 DNA（mtDNA）tRNAleu ～COⅡ 序列进行 PCR 扩增；同时取部分 PCR 产物进行 Dra Ⅰ酶切分析；并根据酶切类型对相应的 PCR 产物经纯化、克隆 leu 和测序后进行序列分析，并构建 Neighbor-Joining(NJ)聚类图。【结果】东北黑蜂 mtDNA tRNA ～COⅡ序列长度 为 526 bp，P 序列缺失，Q 序列有 5 个位点出现碱基转换（4T↔C、1A↔G），1 个碱基颠换（1A↔T）；只有一种 Dra Ⅰ酶切类型，其酶切片段长度分别为 422、64、47 和 41 bp，同 DNAMAN 软件分析的酶切位点一致；其序列特 征和酶切类型同西方蜜蜂线粒体C、O分支相似，而与A 分支的非洲蜜蜂、M分支的欧洲黑蜂存在较大差异；根据 NJ 聚类图，东北黑蜂属于线粒体 O 分支。MtDNA tRNAleu ～COⅡ的序列特征和Dra Ⅰ酶切分析表明，东北黑蜂属于 线粒体 O 分支，与同一分支的高加索蜂、安拉托利亚蜂亲缘关系最近，与 C 分支的意大利蜜蜂、卡尼鄂拉蜂、喀 尔巴阡蜂亲缘关系次之，而与 M 分支的欧洲黑蜂和 A 分支的非洲蜜蜂亲缘关系较远。【结论】根据 NJ 聚类图，东 北黑蜂处于安拉托利亚蜂和高加索蜂之间，东北黑蜂是否是这两个地理亚种的混合种群，或能否算一个新的地理 亚种，还有待进一步的研究。 关键词：东北黑蜂（ leu A.m.ssp.）；亲缘关系； mtDNA tRNA ～COⅡ；序列分析 Analysis of Genetic Relationships of Northeastern Black Bee (Apis mellifera ssp.) in China PENG Wen-jun, LUO Qi-hua, AN Jian-dong, HUANG Jia-xing, GUO Jun (Institute of Apiculture, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100093) Abstract: 【Objective 】 To analyze taxonomy of Northeastern Black Bee (Apis mellifera ssp.), the study was carried out by analyzing the genetic relationships among Apis mellifera mellifera , Apis mellifera ligustica, Apis mellifera canica, Apis mellifera carpatica, Apis mel