对母猪生殖调控的研究.pdfVIP

中国农业科学 2014,47(18):3716-3724 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.18.020 GnIH对母猪生殖调控的研究 1 2 1 1 1 汪 瑶 ，李 珣 ，李敏婕 ，国梦婕 ，雷治海 1 2 （南京农业大学动物医学院，南京 210095 ； 广西大学动物科学与技术学院，南宁530004 ） 摘要：【目的】研究促性腺激素抑制激素（GnIH）mRNA在母猪组织器官中的分布，不同剂量GnIH对母猪卵巢 类固醇激素合成和细胞增殖相关蛋白表达的影响，及 GPR147 与 GnRH 的形态学关系。从分子、细胞水平和形态学 角度，探讨GnIH在下丘脑-垂体-性腺轴对母猪生殖调控的作用机制，丰富神经内分泌学的内容。【方法】以30 日 龄健康仔母猪为研究对象，采用半定量 RT-PCR 方法研究 GnIH mRNA 在母猪 24 个组织中的分布定位。采集青年母 猪卵巢样品，分离卵巢颗粒细胞，研究不同剂量 GnIH（10-6 -8 -10 -12 -1 、10 、10 和 10 mol·L ）对体外培养的母猪卵巢 颗粒细胞类固醇激素（雌二醇，孕酮）的合成、细胞增殖相关蛋白（cyclin B1，PCNA）表达的影响。取 30 日龄 健康仔母猪下丘脑，制作脑片，采用荧光双标记，激光共聚焦显微镜观察拍照分析GPR147与GnRH 的形态学关系。 【结果】GnIH mRNA 主要在母猪的中枢神经系统中表达，尤其是在间脑表达含量最高。在外周组织，如子宫、卵 巢、垂体中也有一定量表达。不同剂量的 GnIH 作用于体外培养的卵巢颗粒细胞，其中 10-6 -10 -1 和 10 mol·L GnIH 能 极显著地抑制雌二醇的分泌（P＜0.01）, 但不同剂量的GnIH对孕酮分泌的影响并不显著。GnIH能极显著地抑制 卵巢增殖相关蛋白PCNA和cyclin B1的表达（P＜0.01）。此外，激光共聚焦结果显示GPR147与GnRH 在下丘脑室 旁核及视前区存在密切联系。【结论】GnIH 可在下丘脑水平通过其受体直接作用于 GnRH 神经元，影响 GnRH 的合 成和分泌，进而在中枢水平调控母猪的生殖活动。在外周生殖器官中，GnIH可通过影响卵巢激素的分泌和细胞增 殖相关蛋白的表达参与母猪的生殖调控。 关键词：母猪；GnIH；半定量RT-PCR；生殖调控 Regulation of GnIH on Reproduction of Female Pig 1 2 1 1 1 WANG Yao ，LI Xun ，LI Min-jie ，GUO Meng-jie ，LEI Zhi-hai (1 College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, Nan