高油酸、中果型花生新材料的创制与鉴定.pdfVIP

中国农业科学 2014,47(19):3898-3906 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.19.019 高油酸、中果型花生新材料的创制与鉴定 李 丽，何美敬，崔顺立，侯名语，陈焕英，杨鑫雷，王鹏超，刘立峰，穆国俊 （河北农业大学/河北省作物种质资源实验室/华北作物种质资源教育部重点实验室，河北保定 071001 ） 摘要：【目的】种质资源是作物育种的基础，创制具有多种表型特征的高油酸花生新材料，对高油酸花生育 种具有重要意义。【方法】以常规品种白沙1016和高油酸花生品系CTWE为材料，通过对2个亲本ahFAD2A 和 ahFAD2B ORF 的扩增与序列分析，确定其突变类型；利用等位基因特异性 PCR（allele-specific PCR，AS-PCR）对两亲本 油酸性状基因型进行确认；采用单粒近红外光谱技术（near infrared reflectance spectroscopy，NIRS）结合 气相色谱（gas chromatographic，GC）分析对各世代单株的油酸及亚油酸含量进行测定；利用产量性状及油酸含 量双重选择压力对F 家系及F 种子进行筛选，并对筛选得到的新材料进行表型鉴定及AS-PCR鉴定。【结果】ahFAD2A 2:3 4 和 ahFAD2B ORF 区域扩增与序列测定结果表明，CTWE 与突变体 F435 的突变位点完全一致，即 ahFAD2A 在 448 bp 处发生G-A碱基替换，同时 ahFAD2B 在442 bp处发生碱基 A的插入。白沙1016在这 2 个位点保持野生型状态。 借助 AS-PCR 反应确定两亲本油酸性状基因型，结果表明，CTWE 为 ol ol ol ol ，白沙 1016 为 OL OL OL OL ，两亲 1 1 2 2 1 1 2 2 本存在2对差异基因。该结果与测序结果相一致。通过设立产量性状和油酸性状双重选择压力对241 个F2:3 家系进 行选择，单株荚果重高于对照冀花2号30%的家系共20个，对20个高产家系均随机抽取5个单粒进行NIRS检测， 淘汰 13 个低油酸家系。对至少含有 1 粒高油酸类型的7个家系内的所有单株进行AS-PCR 检测，共检测到4 种基因 型的个体。通过对 F 家系和 F 单株的室内外考种及 GC 值的测定，筛选出具有不同表型特征、产量高出对照冀花2 号 2:3 4 30%的纯合高油酸材料4个，百仁重介于54.00—75.29 g，均属中果类型，油酸GC值介于 81.10%—82.71%，油亚比 介于28.66—41.19。11-3和13-2的株型均为匍匐3型，均有轻微果嘴和轻微网纹。11-3为蜂腰形荚果，轻微果 腰。13-2为普通形荚果，无果腰。15-2株型为直立型、普通形荚果、无果腰、无果嘴和中等明显程度网纹。16-1 株型为匍匐 2 型、普通形荚果、无果腰、轻微果嘴和轻微网纹。【结论】借助 AS-PCR 辅助选择的方法创制了具有 不同表型特征的中果型高油酸新材料4份。 关键词：花生；高油酸；表型；近红光谱外技术；气相色谱；AS-PCR The Development and Identification of New Peanut Germplasm Materials with High Oleic Acid and Medium Pod LI Li, HE Mei-jing, CUI Shun-li, HOU Ming-yu, CHEN Huan-ying, YANG Xin-lei, WANG Peng-chao, LIU Li-feng, MU G