柑橘衰退病毒RT-LAMP快速检测方法的建立.pdfVIP

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2016-02-27 发布于安徽
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柑橘衰退病毒RT-LAMP快速检测方法的建立.pdf

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中国农业科学 2013,46(3):517-524 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.03.008 柑橘衰退病毒RT-LAMP 快速检测方法的建立 1,2,3 1 1 1 1 1 1 王永江，周彦，李中安，苏华楠，黄爱军，唐科志，周常勇 1 2 3 （中国农业科学院柑桔研究所，重庆 400712 ；河南省农业科学院植物保护研究所，郑州 450002 ；中国农业科学院研究生院，北京100081）摘要：【目的】建立一种反转录环介导等温扩增（reverse transcription loop-mediated isothermal amplification，RT-LAMP）检测柑橘衰退病毒（Ctrus tristeza virus，CTV）的一步法检测技术。【方法】根据 CTV 保守的p25 设计2 对特异性引物，对RT-LAMP 体系的最佳反应条件、特异性、灵敏度等进行研究。【结果】建立了一种特异性检测CTV 的RT-LAMP 方法，该方法的灵敏度比RT-PCR 方法高100 倍，产物通过Acc I 酶切得到验证，而且反应产物中加入SYBR Green I 可直接观察样品是否感染CTV。【结论】RT-LAMP 法检测CTV，其成本低、准确且快速，可满足基层、科研单位等对该病害检测的需要。关键词：反转录环介导等温扩增技术；柑橘衰退病毒；反转录聚合酶链式扩增技术；检测 A RT-LAMP Assay for Detection of Citrus Tristeza Virus 1, 2, 3 1 1 1 1 WANG Yong-jiang , ZHOU Yan , LI Zhong-an , SU Hua-nan , HUANG Ai-jun , 1 1 TANG Ke-zhi , ZHOU Chang-yong 1 2 ( Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Chongqing 400712; Institute of Plant Protection, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450002 ; 3Graduate School of Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081) Abstract: 【Objective 】 The objective of this study is to establish a quick and accurate detection technique of Citrus tristeza virus by reverse transcription