甘蔗Cu_Zn-SOD的克隆和表达分析.pdfVIP

中国农业科学 2013,46(15):3277-3284 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.15.023 甘蔗Cu/Zn-SOD 的克隆和表达分析 1 1 1,2 1 1 1,2 王 盛 ，张保青 ，黄 杏 ，樊艳姣 ，杨丽涛 ，李杨瑞 1 2 （广西大学农学院/广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，南宁530004； 中国农业科学院甘蔗研究中心/广西农业科学院甘蔗 研究所/农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室/广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室/广西甘蔗遗传改良重点实验室，南宁530007 ） 摘要：【目的】克隆甘蔗铜/锌超氧化物歧化酶（Cu/Zn-SOD）基因，并分析其序列特征、组织特异性表达及 在不同逆境胁迫下的表达模式。【方法】以甘蔗桂糖28 号为材料，利用RT-PCR 技术克隆获得Cu/Zn-SOD，采用生 物信息学方法分析所推测的氨基酸序列，通过实时荧光定量PCR 研究Cu/Zn-SOD 在不同组织及逆境条件下的表达 情况。【结果】克隆获得甘蔗Cu/Zn-SOD，NCBI 登录号为JQ958328，其开放阅读框为456 bp，编码151 个氨基酸， 与禾本科植物聚于同一进化分支。实时荧光定量PCR 分析表明Cu/Zn-SOD 在根、茎、叶中均有表达，为组成型表 达，在叶中表达量最高；Cu/Zn-SOD 在聚乙二醇（PEG）、NaCl、低温（4℃）和H O 四种非生物胁迫下均诱导表达， 2 2 表达模式因调控机制的不同而异。【结论】克隆获得 Cu/Zn-SOD，其主要在甘蔗绿色组织中表达，其在铜/锌 SOD 超氧化物歧化酶的功能区域保守型很高，可能与甘蔗抵御渗透胁迫相关。 关键词：甘蔗；铜/锌超氧化物歧化酶；逆境；表达分析；实时荧光定量PCR Molecular Cloning of Sugarcane Cu/Zn Superoxide Dismutase (Cu/Zn-SOD) and Its Expression Analysis 1 1 1,2 1 1 1,2 WANG Sheng , ZHANG Bao-qing , HUANG Xing , FAN Yan-jiao , YANG Li-tao , LI Yang-rui 1 （College of Agriculture, Guangxi University/State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro- Bioresources, Guangxi University, Nanning 530004; 2 Sugarcane Research Center, Chinese Academy of Agricultural Sciences/ Sugarcane Research Center, Guangxi Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Sugarcane Biotechnology and Genetic Im