黄萎病菌毒素联合法鉴定棉花对黄萎病的抗性.pdfVIP

中国农业科学 2015,48(9):1678-1688 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.09.02 黄萎病菌毒素联合法鉴定棉花对黄萎病的抗性 王 铭，臧丽丽，范 凯，李 凤，袁淑娜，申 浩，王学德 （浙江大学农业与生物技术学院农学系，杭州 310058 ） 摘要：【目的】黄萎病菌是危害棉花最严重的病菌，又属于被检疫的病菌，田间接菌鉴定棉花抗病性受到检 疫的限制，通过比较多种鉴定棉花抗黄萎病的方法，提出一种使用黄萎病菌毒素进行联合鉴定的方法，以替代传 统病圃鉴定法。【方法】将待测棉花品系种植于人工气候室内，以常规管理模式培养棉苗，在 21 d 后将所种植棉 苗的根部放入黄萎病菌毒素中浸泡，浸泡72 h时统计病情指数；在待测棉花品系的盛花期取棉株倒数第三片叶片， 用打孔器在叶片上取10—20 个直径约1.5 cm的叶圆盘，将所取叶圆盘浸泡于黄萎病菌的毒素当中，经过24 h后 观察所浸泡的叶圆盘黄化程度，并进行统计分析；综合上述两种方法的鉴定结果，对待测棉花品系的黄萎病抗性 作出评价。【结果】通过对多种鉴定方法的比较，毒素蘸根法、无底塑钵菌液浇根法和菌液蘸根法所需的鉴定时间 较长，而毒素浸根法和毒素浸泡叶圆盘法所需鉴定时间较短；在应用毒素浸根法进行鉴定时，最适毒素浓度为15 μg·mL-1 ，在此浓度下，毒素浸根法的鉴定结果与田间病圃法鉴定结果的相关系数为 0.94（P ＜0.01）；在使用毒素 浸泡叶圆盘法进行鉴定时，浸泡叶圆盘的最适毒素浓度为18 μg·mL-1；在应用毒素浸泡叶圆盘法鉴定时，应于盛花 期选取待测棉花的倒三叶的叶圆盘进行鉴定，其鉴定结果与常规病圃法鉴定结果的相关系数为0.92（P ＜0.01）； 2013 年和 2014 年两年的试验结果证明联用毒素浸根法和毒素浸泡叶圆盘法的鉴定结果与常规病圃法的鉴定结果 相关系数较高。2013年其与常规病圃法的鉴定结果相关系数为0.94（P ＜0.01），2014 年为0.95（P ＜0.01）。【结 论】通过联用毒素浸根法和毒素浸泡叶圆盘法可以准确、环保、便捷地鉴定棉花抗黄萎病性，可以在一定程度上 代替传统的病圃鉴定法，其结果比用单一鉴定方法更为准确可靠。 关键词：棉花；黄萎病；鉴定；方法 A Combined Identification Method for the Verticillium Wilt Resistance in Cotton by Using Pathogen Toxin WANG Ming, ZANG Li-li, FAN Kai, LI Feng, YUAN Shu-na, SHEN Hao, WANG Xue-de (Department of Agronomy, College of Agriculture and Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058) Abstract: 【Objective 】 The Verticillium dahliae is the most harmful fungus for cotton plants and belongs to quarantine fungus. It is restricted to use Verticillium fungus to identify the Verticillium wilt resistance of cotton in the field. Some identification methods were compared in this research. In order to replace this traditional identification method, a new combined method by using Verticillium toxin instead