灰葡萄孢蚕豆分离物的遗传多样性.pdfVIP

中国农业科学 2014,47(12):2335-2347 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.12.006 灰葡萄孢蚕豆分离物的遗传多样性 1,2 1 1 1 2 黄 燕 ，朱振东 ，段灿星 ，武小菲 ，东方阳 1 （中国农业科学院作物科学研究所/ 国家农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程，北京100081； 2 河北科技师范学院生命科技学院，河北昌黎066600 ） 摘要： 【目的】灰葡萄孢是引起蚕豆赤斑病、花腐病和荚腐病的重要病原菌，其为包含两个称作类群 I 和类群 II 的复合种，具有高度的遗传变异。然而，危害蚕豆的灰葡萄孢复合种地位及遗传特征尚未被研究。 论文旨在对中国 6 个不同地理来源蚕豆灰葡萄孢复合种的地位进行鉴定，研究其遗传多样性及群体间的遗传 分化，为探明病害流行规律及制定防治策略提供依据。【方法】在PDA 培养基上观察分离物形态特征。用Flipper 和Boty 特异性引物检测分离物的转座子基因型。葡萄孢复合种所属类群通过 Bc-hch 基因的 PCR 扩增酶切多 态性鉴定，SSR 标记分析解析其遗传多样性和遗传分化。【结果】100 个灰葡萄孢分离物均为灰葡萄孢类群 II， 共产生菌核型、菌丝型和分生孢子型 3 种类型菌落形态，其中 76 个分离物为菌核型。92 个分离物为转座子 基因型，分别含有Boty、Flipper 和Boty+Flipper，其中仅含Boty 分离物最多，占检测分离物的 61.0%。江 苏分离物只含有单一Flipper，重庆、四川、甘肃和河北分离物只含有单一Boty。基于SSR 分析，100 个分 离物被鉴定为 92 个多位点基因型，6 个群体的平均基因多样性指数和平均基因型多样性指数分别为 0.5140 和0.9982；分子方差分析（AMOVA ）发现群体内遗传变异占总变异的86.70%。标准关联指数r 值范围为0.0312— D 0.1261，平均0.0491；遗传固定指数（F ）在0.0085—0.2650，平均为0.1330。UPGMA 聚类将 100 个分离物 ST 划分为 10 个遗传组，大部分遗传组包含不同地理来源的分离物。贝叶斯（Bayesian ）推理分析将92 个多位 点基因型分为两个遗传类群，其中重庆和四川群体聚为一类，青海群体单独聚为一类，而江苏、河北和甘肃 群体由两个不同遗传类群组成。【结论】源于蚕豆的灰葡萄孢群体由灰葡萄孢类群 II 组成，分离物的菌落形 态以菌核型为主，绝大多数分离物为转座子基因型，但转座子基因型分布明显存在地域差异。调查的 6 个群 体都具有高水平的遗传多样性，遗传变异主要来源于群体内，生殖方式以有性繁殖为主，大部分群体间存在 中等到大的遗传分化。 关键词：蚕豆；赤斑病；灰葡萄孢；转座子；遗传多样性 Genetic Diversity of Botrytis cinerea Isolates from Broad Bean 1, 2 1 1 1 2 HUANG Yan , ZHU Zhen-dong , DUAN Can-xing , WU Xiao-fei , DONGFANG Yang