天祝白牦牛LF基因克隆及分子特征.pdfVIP

中国农业科学 2009,42(3):1030-1038 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.03.035 天祝白牦牛 LF 基因克隆及分子特征 1 1 2 3 1 1 1 1 1 1 裴 杰 ，阎 萍 ，姬国红 ，厍 睿 ，冯瑞林 ，朱新书 ，梁春年 ，郭 宪 ，曾玉峰 ，包鹏甲 1 2 3 （中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，兰州 730050 ；甘肃农业大学草业学院，兰州 730070 ；西北民族大学生命科学与工程学院，兰州 730030 ） 摘要： 【目的】哺乳动物乳铁蛋白（ Lactoferrin，LF ）在抗菌、抗病毒、抗肿瘤、调节免疫等方面起着重 要作用。本试验对天祝白牦牛乳铁蛋白基因的编码区进行克隆和分子特征分析。【方法】以处于干乳期的天祝白 牦牛乳腺组织为材料，通过 RT-PCR 克隆了包含 LF 基因编码区的 cDNA 序列（GenBank 收录号为 EU547252）；将克 隆获得的天祝白牦牛LF基因的cDNA与奶牛相应序列进行比对；对天祝白牦牛LF蛋白（GenBank收录号为ACB29795） 与其它物种 LF 蛋白进行序列比对和进化树分析；对牦牛 LF 蛋白的特性和结构进行预测。【结果】克隆获得天祝 白牦牛LF 基因 cDNA 片段长度为 2 344 bp，其中 LF 基因编码区全长 2 124 bp，编码 708 个氨基酸；序列分析显 示，克隆获得的牦牛 cDNA 序列与奶牛该序列存在 15 个碱基的变异，其中位于 LF 基因编码区的变异有 12 个，这 些突变造成4 个氨基酸变异；天祝白牦牛LF蛋白与奶牛、人、小鼠、山羊、绵羊、猪、狗、马、骆驼、猩猩、鸡 LF蛋白氨基酸相似度分别为99.4%、69.5%、63.5%、92.4%、91.5%、72.9%、69.1%、72.6%、75.3%、69.5%和 50.9%； 各物种 LF 蛋白进化树符合物种进化规律；同源建模预测 LF 3D 模型显示，LF 为多肽链在二级结构基础上折叠形 成2个极相似的、对称的球状叶，即N叶和C叶，中间由1段对蛋白酶敏感的α-螺旋连接，呈“二枚银杏叶型” 结构。【结论】从天祝白牦牛克隆获得 LF 基因编码区全长序列并揭示了其分子特征，为牦牛 LF 蛋白基因工程和 蛋白质功能的研究奠定了基础。 关键词：牦牛；LF 基因；克隆；分子特征 cDNA Cloning of lactoferin and Its Characteristics in the Tianzhu White Yak 1 1 2 3 1 1 1 PEI Jie , YAN Ping , JI Guo-hong , SHE Rui , FENG Rui-lin , ZHU Xin-shu , LIANG Chun-nian , 1 1 1 GUO Xian , ZENG Yu-feng , BAO Peng-jia 1 ( Lanzhou Institute of Animal Science and Ve