两步体外成熟法绵羊卵母细胞发育能力的影响.pdfVIP

摘要 体外成熟绵羊卵母细胞随后的胚胎发育能力远低于体内成熟的卵母细胞，其主要 原因之一是卵母细胞的细胞核成熟早于细胞质成熟，即细胞核与细胞质成熟不同步。 本文以绵羊卵母细胞为材料，利用几种核成熟抑制剂组合对其进行两步体外成熟，研 究延迟其细胞核成熟进程，目的是提高体外成熟卵母细胞及后期胚胎的发育能力。 首先，采用不同浓度西洛酰胺(Cilo蛐idc)延迟卵母细胞核成熟进程、促卵泡素 程的抑制具有剂量依赖性，5 度，可使绵羊卵母细胞的核成熟进程延长约4h，而高浓度(10pmol／L和20“mol／L) 率随着FSH浓度增加呈现下降趋势；绵羊卵母细胞在含有5 成熟液中体外成熟28 h，然后进行化学激活的囊胚发育率达至U(40．4％)，显著高于对 照组(29．0％)俨D．删。 组合对卵母细胞进行预成熟2h(第一步成熟)，然后转移至含有5¨mol／L的 Cilostamide成熟液中继续体外成熟28h(第二步成熟)。其研究结果表明：第一步成 熟中的抑制剂组合适宜浓度为100 IBMX+100FSK或100 Itmol／L vmol／L I_unol／L IBMX+50 Imml／L 差异不显著(胗D．05)。 IBMX处理组；第二步成熟过程中，随着成熟时间的延长，实验组及对照组卵母细胞 h、20 内cAMP水平均呈降低趋势，在成熟第9h时对照组卵母细胞中cAMP水平已 降至较低而实验组卵母细胞中cAMP仍然保持较高水平。到30h时实验组与对照组 卵母细胞内cAMP水平相比，差异不显著paos)。 关键词：3一异丁基．1．甲基黄嘌呤；毛喉素；西洛酰胺；卵母细胞；体外成熟；绵羊 in TheEffect Maturationvitrofor from ofTwo-step DevelopmentalCapacityofOocytesSheep Author：Hu yu跹yuan Advisor：Tian Shujun and Major．AnimalGenetics，BreedingReproduction Abstract At ofovine maturatedin subsequentembryodevelopmentability oocytes present,the than from mainreason isfarlowerthe derivedinvivomatured vitro embryos oocytes,the bethenuclearmaturationearlierthan maturation．Itisto may cytoplasmic sayoocyte and this were nuclear maturationisnot synch