新生山羊小肠上细胞系的建立.pdf

新生山羊小肠上皮细胞系的建立 研究生：匡伟 导师：赵国琦教授 009) (扬州大学动物科技学院，225 摘 要 动物细胞和组织培养已经被广泛的运用于细胞和分子生物学领域，其中更多 的应用于细胞分化机制的研究。小肠是食物进行消化吸收的主要场所，而小肠黏 膜上皮细胞(Intestinalepithelial 与肠道食糜的消化、吸收、免疫屏障和应激反应等，并与肠道的内、外分泌功能 有密切关系。因此，进行小肠上皮细胞的分离培养是研究小肠功能、病理、分化， 营养物质吸收机制及其调控的主要手段之一。 本试验使用了组织块和酶消化等多种方法分离新生山羊小肠上皮细胞，结果 发现组织块培养可以分离纯化出增殖能力较强的小肠上皮细胞，通过刮除等方法 性蛋白酶I联合使用可获得完整的绒毛隐窝单位，其中的上皮细胞结构完整，24h 内贴壁，增殖能力较强，48h内形成明显的集落。但传代后细胞难贴壁，增殖能 殖能力较强的上皮细胞，但是传代后细胞难以贴壁，增殖能力明显减弱。 mmol／mL)、EGF(O～20 ng／mL)和胰岛素(0-20 影响，研究发现其他营养条件一致，FBS为10％，Gln浓度为2 浓度为10 验中采用了两种冻存液对获得的山羊IEC进行冷冻保存，发现冻存液中添加葡聚 糖对冻存的山羊IEC具有保护作用，能显著提高冻存细胞的存活率。 关键词 小肠上皮细胞，分离，培养，冻存复苏，山羊 EstablishmentofIntestinal CellLine Epithelial fromNeonatalGoat Advisor：Prof．Zhao Guoqi ofAnimalScienceand College Technology,YangzhouUniversity,225009 ABSTRACT cell tissueculturehasbeen usedincell andmolecular Animaland widely biology biology, the ofmechanismofcellditierentiation．Smallintestineisthemain 0fl especiallystudy place for and ofnutrient．Intestinal the digestionabsorption epithelialceils(IEC)ateprimary in functionalcells intestinaltract．Besides in participating and are relatedto functionintemaland immunizationbarrierstressreaction，IECs closely secretery externalintestine．Asa andcultureofintestinalcelBiSone means