家蚕和桑叶中1脱氧野尻霉素含量变化的研究.pdfVIP

摘 要 1．脱氧野尻霉索(DNJ)及其衍生物是一种高效的a一葡萄糖苷酶抑 制剂，可用于治疗糖尿病、肥胖症、病毒感染等疾病。目前已发现多种植 物和微生物具有合成和积累DNJ的特性，其中以桑叶中的含量最高。家 蚕一生食桑，且对DNJ具有富集作用，其体内的DNJ含量又远高于桑叶。 因此DNJ是桑和蚕体中的重要生理活性物质，尤其是与其降血糖作用密 切相关。但是，由于受测试方法的限制，目前对于桑叶和蚕体中DNJ含 量的变化或富集规律尚缺乏系统研究。有鉴于此，本文首次建立了反相高 用该方法系统研究了桑叶中DNJ含量的变化规律，以及蚕体对DNJ的富 集作用，并探讨了脱脂全蚕粉的降血糖效果。旨在为筛选富含DNJ的蚕 桑资源或其他生物资源、制定衡量全蚕粉和桑叶制品降血糖效果的质量指 标等提供参考。主要研究结果如下： mol／L 1以O．05 HCI为溶剂提取蚕粉和桑叶粉中的DNJ，以9．芴基氯 甲酸甲酯(FMOC)作为衍化剂，在pH8．5硼酸盐缓冲液中进行衍生化反 应，生成具有紫外吸收的DNJ．FMOC络合物，用反相高效液相色谱．紫外 检测法分离测定DNJ．FMOC。结果表明，反应产物的色谱图分离效果良 好，DNJ．FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系，加样回收率平 均为100．7％，精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验表明， 该方法是稳定可靠的，可以作为测定家蚕、桑叶及有关药物中DNJ含量 的有效方法。 2利用RP．HPLc．Uv法测定了不同全蚕粉样品中的DNJ含量，发 现DNJ的含量受蚕品种、饲料、饲养季节、蚕粉的加工处理方法等多种 因素的影响。在供试的9个蚕品种中，菁松品种的DNJ含量最高；养蚕 用叶在供试的6个桑品种中，以农桑14最佳；季节和叶位以春季适熟叶 较好：桑叶中的DNJ含量与蚕体的含量呈明显的正相关关系。蚕粉的加 工以饥饿、冷冻干燥或100。C烘干的样品DNJ含量较高，微波干燥最差， 但干燥蚕粉用微波灭菌处理对DNJ含量影响不大。 V 3研究了桑叶中DNJ含量与季节、品种、叶位等因素的关系。结果 表明，春季桑叶中品种间DNJ含量变化不大，夏秋两季桑叶的DNJ含量 随桑品种和叶位变化显著，普遍存在上位叶中位叶下位叶的规律。春 季桑叶农桑14号品种的含量最高；夏季以7946号上位叶含量最高；秋季 则以湖桑32的上位叶含量最高。枝条上部的嫩叶DNJ含量在不同季节、 不同品种间变化较小，但湖桑32秋季叶的DNJ含量稍高于其他叶；适熟 叶中DNJ含量受品种和季节的影响较大，5个桑品均是春季叶含量高于夏 季叶，其中陕305的春季叶和湖桑32的秋季叶DNJ含量较高。 4探讨了蚕体对DNJ的富集规律。蚁蚕体内检测不到DNJ，从l龄 盛食期至5龄起蚕DNJ含量相对稳定，5龄期含量逐渐减少，蛹体的含量 显著低于幼虫，成虫体内含量几乎为0，在各发育阶段中以2龄眠蚕的 DNJ含量最高。在蚕体不同组织、器官中DNJ的含量存在很大差异，消 化管和血液中的含量明显高于其他组织器官，丝腺中几乎检测不出DNJ。 另外还测定表明，人工饲料饲养的蚕体内不含DNJ，雄蚕体内DNJ含量 稍高于雌蚕。 5探讨了全蚕粉脱脂处理对其DNJ含量以及降血糖效果的影响。结 果表明，脱脂蚕粉的DNJ含量高于未脱脂蚕粉，且高温干燥处理的蚕粉 DNJ含量高于未处理的蚕粉，说明脱脂及高温干燥不会造成DNJ的丢失 或破坏。利用取食高糖饲料的小鼠和糖尿病模型小鼠试验表明，全蚕粉、 脱脂全蚕粉及其复合物均有不同程度的降血糖作用，但脱脂全蚕粉比未脱 脂全蚕粉的降血糖效果有下降趋势。 关键词：1-脱氧野尻霉素；家蚕：桑叶；含量测定：富集规律；降血糖作 用 ABSTRACT Q— and areeffcctive itsramifications 1．deoxynojirimycin(DNn are in andvirus