家蚕几丁质酶基选择性剪切及表达的研究.pdfVIP

摘要 几丁质是自然界中最重要的生物高分子之一。它是昆虫外骨骼的主要结构组 分，保护昆虫免于环境伤害和捕食，维持昆虫个体的形态，另·方面它能保护中 肠的上皮细胞免于饮食成分的机械损伤和病原体造成的生物损伤，同时可作为消 化腔调节渗透性，酶定位和消化产物。昆虫生长和形态发生改变受几丁质酶的严 格限制。昆虫在不同组织中不断生产几丁质合酶和几丁质酶，几丁质合成和分解 的协调需要发育过程中参与酶的严格调控。对昆虫几丁质酶的结构、形成、分类 和作用机理的研究非常有意义。 本论文在分析大量家蚕组织EST数据、基因组数据等的基础上，利用RT-PCR 法克隆了家蚕几丁质酶(砌凹丁)基因的选择性剪接体BreCHT3，并分别验证了 1217、359、540、1 150、861bp，内含子和外显子的边界序列都符合典型的GT／AG 规则。家蚕与赤拟谷盗，果蝇等昆虫几丁质酶基因功能域的进化树分析结果显示， 昆虫几丁质酶基因按功能域进化树分类可分为五大类，家蚕BreCHT基因的4种 因在表皮组织和中肠组织中表达较高，在血球和丝腺中基本不表达；在5龄幼虫 期食桑期基本不表达，熟蚕期(S0)开始表达并增大。 关键词：家蚕，几丁质酶，Bmar打基因，mRNA选择性剪接 lO ABSTRACT Chitinisoneofmost innature．Itisthemain importantbiopolymer composition ofinsect insectfromenvironmentaland exoskeleton姗ctl鹏，protecting damage the of the ofinsects．Ontheother shape predation，maintaininginsect，limitinggrowth handitcan theintestinal from cells mechanicalcaused protect epithelial damage by atthesametime the asa pathogens，and adjustingpermeabilitydigestivecavity,a and ofinsectisinthestructivecontrol digestiveenzyme．Thegrowthmorphogenesis to ofchitinase．Insectscontinue chitin andchitinaseindifferent producesynthase tissues．Chitinand ofthecoordinationneedsinthe synthesisdecomposition enzyme the ofstrict theresearch of蚰mcture， duringdevelopmentregulation．Theref．ore andmechanismofactionaboutinsectchitinaseis formation,classification