PCR技术在微生物的进展要点.pptVIP

PCR技术应用于微生物进展 专业： 姓名： 学号： 福建师范大学 聚合酶链式反应（PCR） PCR是什么：聚合酶链式反应。是一种体外酶促合成特定基因或DNA片段的分子生物学技术。通常由高温变性，低温退火（复性）及适温延生这3步反应组成的一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增。 ①加样 ②扩增 ③电泳 ④观测 ⑤结果分析 PCR流程 PCR的优点 1 特异性强? ①碱基互补配对原则 ②Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性 ③靶基因的特异性与保守性 2 灵敏度高? 能将pg级的起始待测模板扩增到ug水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞。 3 简便、快速? PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在PCR仪上进行扩增反应，一般在2～4小时完成。 4 对样本DNA的纯度要求低? 不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品均可作为扩增模板。 微生物检测方面应用 （1）常规PCR技术 （2）多重PCR技术 （3）RT-PCR技术 （4）实时荧光定量PCR技术 （1）常规PCR技术 关于一次性使用卫生用品的微生物指标规定，我们可以了解到：不能有大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌存在于一次性使用卫生用品中。 通常要求定性检测这四种菌，规定采用的检测方法是微生