唐菖蒲原生质体离、纯化及培养的研究.pdf

摘要 摘要 唐菖蒲(Gladiolus hybridus 根花卉，是世界著名的四大切花之一。唐菖蒲切花生产是我国花卉产业的重要组成部分。唐 菖蒲是病虫害发生最为严重的花卉之一，利用原生质体导入外源基因为唐菖蒲抗病育种带来 希望。目前我国唐菖蒲的栽培品种和生产用球绝大多数从国外引进，唐菖蒲的品种繁育工作 不足，唐菖蒲原生质体分离、纯化及培养技术的研究将为唐菖蒲育种工作奠定基础。 本试验以唐菖蒲子球茎为材料，建立唐菖蒲原生质体分离、纯化及培养体系。主要结果 如下： 2．三种类型唐菖蒲愈伤组织：I型为近胚性愈伤，II型为非胚性愈伤，m型为中间型 愈伤，其中I和Ⅲ型愈伤组织培养2～3月后可得到胚性愈伤。胚性愈伤在MS+2，4．D2．OmeCC +6．BA0．5mg／L培养基上培养有利于唐菖蒲胚性愈伤的保持。 3．唐菖蒲悬浮培养细胞系的培养方法为：悬浮细胞的初始接种量为29／40ml，初始继 于原生质体活力的提高。 4．露醇保持唐菖蒲原生质体渗透压稳定的浓度为O．6mol／L。 5．唐菖蒲叶片在O．6mol／L甘露醇中预处理1h分离得到的原生质体产量和活力较高； 继代培养2个月左右的悬浮培养细胞系分离的原生质体产量和活力较高。 1．5％+PectinaseY-230．5％和Cellulase“Onzuka”RS2．O％+PectinaseY-230．5％，酶解时间为 2h，pH5．6；酶解的条件为：黑暗下27C，于摇床上振荡酶解(40rAnin)。 7．原生质体培养的方法为先液体后包埋法，其培养基分别为：叶片“超级玫瑰”KMsP 6-BA0．1mg／L。 关键词：唐菖蒲：胚性愈伤：悬浮培养细胞；原生质体 III 、 Abstract on Studiesthe Protoplast Separation， PurificationandCultureof Gladiolus Abstract Gladiolus calledswordor oneof hybridusHort，also gladiolus，isperennialmonocotyledonous bulbousflowersof isone ofthefourworld．famouscutflowers．Cut gladioluslridaceae，which flower isthe offlower productionofgladiolusimportantparts industry． isone most Gladiolusofthe seriousdiseasesandinsect ofallflowers．Itthe new pests brings forthedisease-resistanceofthe totransform hope breedinggladiolus foreigngenesbyprotoplast method．Nowmostof varietiesandcormsusedin comefrom and lack