抗猪轮状病毒v6单克隆抗体的制备与鉴定.pdfVIP

摘要 摘 要 本研究用纯化的重组PRVVP6蛋白作为免疫原，免疫8周龄BALB／c雌性小鼠，运用淋 巴细胞杂交癯技术，通过问接ELISA筛选，采用有限稀释法。经过4次克隆筛选，获得了 一株稳定分泌抗PRV 类．杂交瘤细胞的平均染色体数为93，细胞培养液上清及腹水效价分别为1：800和1： I×106，且C。鼠。单克隆抗体不与猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病 病毒发生交叉反应，显示良好的特异性。 用抗PRV 进行了间接免疫荧光检测病原的比较研究：M?Ab所进行的间接免疫荧光染色后，PRV感染 细胞培养物中多数细胞在其胞浆和细胞膜上出现绿色闪亮荧光，且荧光强度强，未接种病 毒的细胞培养物未见有绿色闪亮荧光染色的细胞存在；利用PRY全病毒制备的抗血清对接 种病毒和未接种病毒的细胞培养物进行间接免疫荧光试验表明．接种病毒的细胞培养物染 色质．荧光强度强，但未接种PRY的细胞培养物亦有一定的非特异性荧光反应。结果表 VP6蛋l白McAb进行间接免疫荧光法对病原检测具有很高的特异 明，利用所研制的抗PRY 性。 c5D。单克隆抗体与其他腹泻病病毒之间的特异性反应实验及免疫荧光(IFA)实验结 果亦表明，所制备的抗猪轮状