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两种植物多糖的提取及对中华绒螯蟹免疫功能影响的研究 中文摘要 中文摘要 以米糠和山药为材料，采用热水浸提法，通过单因素和L母(34)正交试验，研究 了乙醇浓度、提取时间、水料比和提取温度对米糠和山药多糖得率的影响。结果表明， 米糠多糖最佳提取工艺为：乙醇浓度95％、提取时间5h、水料比20：1、提取温度i10℃； h、水料比15：1、提取温度loo℃。 山药多糖最佳提取工艺为：乙醇浓度95％、提取时间3 在此基础上，研究了微波辅助对两种多糖得率的影响，结果发现，米糠和山药经650w 微波功率在中火力条件下预处理4min，再按热水浸提的最佳工艺进行提取，两种多 糖的得率均明显提高，分别达到1．33％和2．48％，明显优于常规热水浸提法的O．920％ 和2．025％。 将实验室自制的两种植物多糖一米糠多糖(含量77．8％)和山药多糖(含量71．6％) 以10 m眺g和20mg／lcg体重的剂量体腔注射中华绒螯蟹，以生理盐水注射和不作任 d采样，对血细胞总量(THc)、 何注射的蟹为对照，在注射多糖后的第l、3、5、8 不同类型的血细胞数量(DHC)，血细胞的吞噬活性、呼吸爆发活性(02．产量)，血 细胞破碎物上清液(m。S)的总酚氧化酶(P0叶)、血清酚氧化酶(Po)、过氧化物酶 d，从每个处理组中取蟹6只，以1．2×107cfIl，l【g体重的剂量体腔注射蟹致病性嗜水气 单胞菌cL99920菌株，记录接种7d后各组蟹的累积死亡率。结果显示，两种多糖均 能明显增强中华绒螯蟹的免疫功能和对嗜水气单胞菌的抗感染能力，而且低剂量组的 效果优于高剂量组，表明两种多糖可能都属于双向免疫调节剂。 本课题还初步研究了两种植物多糖激活中华绒螯蟹血细胞proP0系统的信号传 导途径。用适量的多糖和几种细胞信号转导的激活剂或抑制剂处理M·199培养的离 体中华绒螯蟹血细胞一定时间，通过检测血细胞胞内外酚氧化酶(PO)的增减情况， 对多糖触发舯oP0激活系统的信号传导途径进行评价。结果表明，两种多糖触发中华 绒螯蟹血细胞伽oPO系统的信号传导途径相似，均可能是经过Pl∞而非PKA途径进 行信号转导，进而促进p∞DPO颗粒的释放、转化与合成，并通过酪氨酸蛋白激酶途径 进行负调控。 关键词：中华绒螯蟹：植物多糖；免疫；酚氧化酶原激活系统；信号转导 作 者：陈星 指导教师：李义 两种植物多糖的提取及对中华缄螫蟹免疫功能影响的研究Als咖Ict Studiesonextractionandef蕾ectsontheimmune ofChinese 阳sponse mitte咀c豫b伍枞咖砌绷哟of 佃oI‘indsOf plantpolysaccharides Abstl翟ct Thew|t*soluble we∞ex仃amed丘om polysacc蹦des f犯tortcst缸Id b (D而∞伽伽俐删bysingle ornlogonale)【perimemdesi弘menlods thatthebest water msul协iIldicated hot ex订action ofriceb姗 (34)．Thc tecllllology time