pten与akmtor通路在食管癌进展中的研究.pdf

IUlII IIIHllMU IIIIII 目 录 Y2337330 中文摘要…………………………………………………………………一1 英文摘要……………………………………………………………………5 研究论文PTEN与AKT／mTOR通路在食管癌进展中的研究 —1上．—jL 日!J吾…………………………………………………………………………………………一9 材料与方法……………………………………………………………．10 结果…………………………………………………_……………………………………．23 附图……………………………………………………………………·25 讨论…………………………………………………………………………………………··33 结论…………………………………………………………………………………………．．36 参考文献………………………………………………………………36 综述哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR的研究进展……………………40 致谢…………………………………………………………………………………………………53 个人简历……………………………………………………………………54 中文摘要 PTEN与AKT／mTOR通路在食管癌进展中的研究 摘 要 我国是世界上食管癌的高发区，其最常见的组织学类型是鳞状细胞 癌。尽管食管电子内镜检查和黏膜活检是高危人群筛查和早期发现诊断的 有效手段，但并没有作为普查手段在食管癌高发区推广使用，因此大部分 食管癌患者早期发现困难，病人就诊时部分已是中晚期，预后不佳。大量 分子生物学研究资料表明，食管癌的发生、发展是多阶段、多基因参与， 多种转录因子共同调控的过程，然而其确切的发病机制尚不清楚。因此， 研究食管癌进展过程中细胞内各种信号转导通路的异常活化(ERK通路、 AKT／mTOI通路)及新型抗肿瘤药物的靶点，依然是临床治疗食管癌的主 要目标。 多个研究报道证明，AKT／mTOR信号传导通路在肿瘤发生发展中存在 异常的激活。同样，在食管癌的发生过程中也证实了存在此通路的持续激 活，进而导致食管癌的发生。AKT／mTOR通路介导肿瘤发生发展的主要机 制是抑制细胞凋亡、促进细胞增殖、调控细胞周期，促进肿瘤的血管化以 信号分子，参与调节细胞的生长发育、迁移侵袭，在肿瘤进展中表达异常 一个具有磷酸酶活性的抑癌基因，且同时具有脂质酶活性，在多个恶性肿 瘤中存在异常的突变或功能缺失。近年来研究表明，PTEN能够负向调节 表达，从而达到诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖的作用。 本实验分别转染高活性的PTEN质粒、S 及m 发生的一系列分子、蛋白水平及食管癌细胞增殖能力的变化，更深入的了 管癌提供可靠的理论依据。 通路以及食管癌细胞增殖的影响。 中文摘要 方法： PTEN、AKT及m Blot方法检测 TOR分子水平的区别以及使用Western 转染组较其他两组细胞内PTEN、p-AKT蛋白水平的区别。 PTEN、AKT及mTOR分子水平的区别以及使用WesternBlot方法检测 转染组较其他两组细胞内PTEN、p-AKT蛋白水平的区别。 3扩增PTEN质粒，细胞计数法及MTT检测转染组较其他两组食管 癌细胞增殖能力的区别。 4扩增mTOR质粒，通过RT．PCR方法检测转染组较两组分子水平 mTOR的区别。 结果： 84±0．036，1．171±O．037，1．138+0．05 异(TEl：1．1 1．144±0．020，1．050±0．019，P0．05)。 Western O．809±0．050，O．803±0．067，0．400±0．051)，差异具有统计学意义(P