实验4红、白细胞记数,红细胞渗透脆性实验.pdfVIP

实验四 血液生理 n １．红细胞计数 n ２．白细胞计数 n ３．红细胞渗透脆性实验 血细胞及其功能 3类血细胞 红细胞 / 白细胞/血小板 均来源于 造血干细胞 一.红细胞生理  1.红细胞的数量、形态和功能 数量:  男性:500万个/µl  女性: 420万个/µl  形态: 双凹圆碟/盘形， 表面积 /体积 比值大 增加气体透过面积 /变形能力 功能: 主要为结合和携带氧  2.红细胞比容 红细胞在血液中所占的容积百分比 男 40­50%   /  女 37­48% •  RBC膜脂质双分子层为骨架的半透膜  O ，CO 和尿素可以 自由透入。  2  2  RBC能量供应主要通过糖酵解和磷酸戊 糖通路，消耗葡萄糖以ATP方式产生能量  +  +  *主要供应Na 泵活动。保持Hb  Fe2 不被氧 化，保持膜完整性，保持特有形态。  *血库保存血液时，多加入葡萄糖以供应RBC  需要。否则ATP不足，膜稳定性受影响，  RBC破坏。 二.白细胞(Leukocyte,white blood cell)  定义­­­为一类有核血细胞。  9  0.4­1.0×10  /L(4000­10000/ul)。  WBC分类：粒细胞，单核细胞，淋巴细胞  (40%)。 粒细胞：中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细 胞，占60%。 一.红、白细胞记数 实验目的：了解红细胞，白细胞计数的原 理，掌握计数红、白细胞的方法。 n 实验原理：一定量的血液稀释后，置于 血细胞计数室内，计算一定体积的血细 胞数，然后在换算成每立方毫米或 １Ｌ 血液中的血细胞数。 方法与步骤 １．血细胞计数板的准备：计数室只能用自 来水和蒸馏水冲洗，然后以丝巾轻轻擦 干，切不可用酒精和乙醚洗涤。洗涤完毕 后，放入低倍显微镜下观察其构造。 血球记数板构造：两个计数室，每室分为9个大格。 格与盖玻片的距离为0.1mm，每大格边长为1mm，面 2 3 积为1mm ，体积为0.1mm 。四角的4个大方格分为16 个中方格，用作白细胞计数。 中央大方格被分为25个中方格，每个中方格边长为 2 3 0.2mm，面积为0.04 mm ，体积为0.004mm 。每个中 方格又分为16个小方格，中央大方格四角的中方格 和中央的中方格用作红细胞计数。 构造图 ２．采血及稀释： （1）配制稀释液：用移液管吸取1.99ml红细胞稀 释液 （生理盐水）放入1号试管，用移液管吸取 0.38ml白细胞稀释液 （2%醋酸加少量龙胆紫）放 入2号试管。 （2）采血：用吸血管吸取血液10ul放入1试管，用 吸血管吸取血液20ul放入2号试管，摇匀试管， 使血液与稀释液充分混匀。 ３．计数：盖玻片放好后，滴半滴于计数室与盖玻 片交界处，稀释血液可自动均匀渗入计数室。放 置1-2分钟，待细胞下沉后进行计数。 记数原则  1. 计数红细胞：将计数室中央的大方格置于视野 内，转用10倍物镜下计数5个中方格（四角和中 央）内的红细胞总数。计数时必须遵循一定方向 逐格进行，如将上侧和左侧线上的红细胞数入， 则勿将下侧和右侧线上的数入。  2.计数白细胞：10倍物镜下计数四角四个大方格中 所有的白细胞总数。 记数原理 3 红细胞数：红细胞数/ mm 5个中方格数的 得的红细胞总数×10000