伽玛刀治疗大鼠胶质瘤前后vegf、pcna表达及细胞凋亡的研究.pdf

中文摘要 伽玛刀治疗大鼠脑胶质瘤前后VEGF、PCNA表达及细 胞凋亡的研究 摘 要 目的：脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的肿瘤。因其向 脑组织内呈浸润性生长，因此常规的手术加放疗、化疗效果 差，且易于复发，病人的生存期不足一年，是目前神经外科 学界正着力解决的难题。 自从1968年瑞典的LasLeksell教授发明伽玛刀以来， 作为神经病学领域一种新的治疗方法，立体定向放射神经外 科(SRS)治疗在治疗某些颅内疾病方面，已经部分取代和 补充了传统的神经外科手术。SRS用于脑胶质瘤的治疗已有 许多临床报道，疗效肯定，但是不少患者仍有肿瘤复发，以 及并发较严重的放射反应，如严重脑水肿等。用C6大鼠脑 胶质瘤细胞株建立的脑胶质瘤模型是一种比较稳定的动物 模型，国外有人用伽玛刀以不同剂量对C6胶质瘤大鼠模型 进行照射，观察其生存期和病理学变化，肯定了SRS可以缩 小肿瘤体积，延长患鼠生存期，通过MRI扫描检查，可以观 察到肿瘤的缩小。关于伽玛刀治疗后细胞凋亡，国外已有少 数的报道。伽玛刀治疗胶质瘤后对血管内皮生长因子 面的报道。本实验对C6胶质瘤大鼠模型进行伽玛刀治疗， 应用免疫组化方法观察VEGF、PCNA表达变化，用流氏细 胞仪检测细胞凋亡的情况，分析治疗前后不同时间点大鼠脑 胶质瘤细胞的增殖、凋亡和血管内皮生长因子的动态变化， 中文摘要 探讨这些治疗效应在放射外科中的意义，为伽玛刀治疗脑胶 质胶质瘤提供理论依据。 方法：用立体定向仪将c6大鼠脑胶质瘤细胞株针刺接 种于SD大鼠脑内，建立C6大鼠脑胶质瘤模型。选用SD大 鼠共120只，分为伽玛刀治疗组和对照组，每组60只，接 种后10．14天行MRJ检查，确定成瘤并确认模型制作成功。 给治疗组大鼠安装头颅固定仪及立体定向头架，用M砌 扫描定位，并将数据传至计划系统，以胶质瘤中心作为靶点， 肿瘤边缘剂量为35Gy，等剂量曲线为50％，进行伽玛刀治 间点12只动物，取病理组织分别进行流式细胞学检测和免 疫组化ME染色。 用免疫组化方法观察血管内皮生长因子(VEGF)、增殖 细胞核抗原(PCNA)表达变化，用流氏细胞仪检测细胞凋 亡的情况。 对照组确定成瘤后不做任何干预，与治疗组相同时间点 取材． 结果： l PCNA结果：典型的PCNA表达阳性细胞，均为细胞 核着色，胞核呈黄色或棕黄色。对照组肿瘤细胞明显表达 PCNA，表现为阳性细胞排列密集，胞核呈强阳性。治疗组 大鼠于伽玛刀照射后48h即可见肿瘤内PCNA阳性细胞减 少，胞核阳性强度减弱。随着时程推后，阳性细胞面密度(阳 性细胞面密度=观察区内阳性细胞的总面积／观察区内所有细 胞的总面积)呈下降趋势，在瘤周正常组织内可见到少量散 在的PCNA阳性细胞。 中文摘要 2VEGF结果：VEGF染色定位子瘤细胞胞浆内，对照组呈 强阳性(+++)表达，治疗组大鼠于伽玛刀照射后48h即可见肿 瘤内VEGF阳性细胞减少，胞浆阳性强度减弱。阳性细胞面 密度随时间延长呈下降趋势． 3细胞凋亡结果：伽玛刀治疗组肿瘤凋亡率明显高于对 照组(PO．05)，于治疗后24h即可见肿瘤细胞凋亡率较对照 组升高，照射后48h，细胞凋亡率达到最高峰，然后逐渐下 降。 结论： 伽玛刀治疗后PCNA阳性表达细胞数与对照组相比表达 减少，并随时间延长进一步减少，表明伽玛刀对肿瘤细胞增 殖有抑制作用。治疗组大鼠VEGF表达较对照组减少，与 PCNA变化呈正相关，表明伽玛刀治疗后肿瘤血管生长受到 抑制。伽玛刀治疗组凋亡率较对照组明显升高，并于48h达 到峰值，以后逐渐下降。说明伽玛刀照射肿瘤组织可诱导其 产生凋亡，抑制肿瘤生长。 关键词：胶质瘤；伽玛刀；血管内皮生长因子(VEGF)； 增殖细胞核抗原(PCNA)；凋亡 荚文摘要 The ofVEGF、PCNAand study expression ap