大鼠急性心肌缺早期par和parp-1裂解片段p89的表达变化.pdfVIP

11[ILl[qILI II[qLLILILHII IILlll 目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………3 英文缩写…………………………………………………………………．．6 研究论文大鼠急性心肌缺血早期PAR和P触冲．1的裂解片段P89的 表达变化 前。言……………………………………………………………………8 日U舌……………………………………………………………………萏 材料与方法 ………………………………………………………．．9 结果…………………………………………．………………………．15 附图……………………………………………………………………16 讨论…………………………………………………………………．．22 结论…………………………………………………………………．．25 参考文献…………………………………………………………………．．25 综述PARP．1在心血管疾病中的研究……………………………………30 致谢………………………………………………………………………．42 个人简历…………………………………………………………………．43 中文摘要 大鼠急性心肌缺血早期PAR和PARP-1的裂解片段P89的 表达变化震迈婴亿 摘 要 目的：急性心肌梗死 龇m 引发的猝死现象频发，大多数病人在发 病后6小时，甚至1小时内死亡。常规的衄染色在心肌缺血至少6小时 后才会出现光镜下的形态学变化 如心肌纤维波浪样变，炎细胞浸润，心 肌细胞嗜酸性增强等 。而在法医学实践中，-伽猝死者死后常规检查除 可见冠状动脉及其分支存在不同程度的动脉粥样硬化外，由缺血性损伤因 素所致的病理形态学改变很难检出，使早期心肌梗死的死后诊断成为法医 病理学鉴定的难点。急性心肌缺血早期心肌细胞内多聚ADP核糖合成酶 裂解而形成P89片段。因此本实验采用IHC技术和WesternBlot技术对大 鼠急性心肌缺血早期不同时间点心肌细胞内的PAR和P89片段的表达情 况进行观察，以期寻找其表达规律，用以辅助AMI引起的心源性猝死 SCD 的死后诊断。 的方法建立大鼠急性心肌缺血模型；缺血组大鼠分别于结扎LAD后O．5h、 扎，分别于术后O．5h、lh、2h、4h及6h处死取材。常规制作石蜡切片， 用HE染色观察大鼠心脏的组织病理改变，并用IHC方法观察心肌组织中 PAR及P89片段表达的变化；用WestemBlot方法测定P89片段表达情况。 显著性差异。 结果： 1HE染色：各假手术组心肌细胞结构清晰，胞核蓝染，未见明显异常的 形态学改变。急性心肌缺血2h之内仅见部分心肌细胞间质轻度水肿，偶 见心肌纤维嗜酸性增强，4h组可见间质少量炎细胞浸润，心肌纤维肿胀 中文摘要 及波浪样变，但未见显著细胞坏死；6h组偶见心肌纤维断裂和心肌收缩 带坏死。 2珥【C染色： 2．1缺血后不同时间点缺血心肌PAR表达情况 假手术组：心肌细胞胞核中PAR未见阳性表达； 缺血组：心肌细胞胞核在急性缺血O．5h时即有PAR弱阳性表达，其 散在分布于心内膜下，随着缺血时间的延长，PAR阳性细胞核数量明显 增加，表达区域进一步扩大，缺血2h时进展至心肌中层，至缺血6h时 PAR的表达达到高峰，阳性表达区域累积缺血区心肌全层。各组大鼠非 缺血区心肌细胞核未见P89片段的阳性表达。 2．2缺血后不同时间点缺血心肌P89片段表达情况 假手术组：心肌细胞胞核中P89未见阳性表达； 缺血组：急性心肌缺血O．5h后缺血区心肌细胞胞核中P89片段表达 呈弱阳性，散在分布于心内膜下，随着缺血时间的延长，P89片段阳性细 胞核数量明显增加，表达区域进一步扩大，缺血4h时进展至心肌中层， 至缺血6h时PAR的表达达到高峰，阳性表达区域累积缺血区心肌全层， 各组大鼠非缺血区心肌细胞核未见P89片段的阳性表达。 3Western Blot结果： P89片段表达结果：与假手术组相比，急性心肌缺血组O．5h后P89 片段表达明显增加且其表达强度随着缺血时间的延长而增加，缺血6h时 达到高峰。 表达强度有随着缺血时间延长而逐步增加的趋势，表达范围由心内膜逐渐 向心肌纤维扩散，最后累计心肌全层。两个指标的敏感性高，在急性心肌 梗死死后诊断的法医学实践中可作为参考指标之一。 Blot 免疫组织化学；Western 英文摘要 ofPARand of Expressions cleavagepoly ADPribose P89in ofratswithacute polymerase-1 cardiomyocytes infarction myo