大鼠脑创伤后氯及头孢曲松对海马神经元自噬调节的研究.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………4 英文缩写……………………………………………………………………8 研究论文大鼠脑创伤后氯喹及头孢曲松对海马神经元自噬调节的研究 前言………………………………………………………………………………………99日!J舌……………………………………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………．10 结果……………………………………………………………………………………．20 附图…………………………………………………………………………………24 附表……………………………………………………………………………………．39 讨论……………………………………………………………………………………．42 结论……………………………………………………………………………………．47 参考文献…………………………………………………………．48 综述 谷氨酸转运体在神经系统疾病中的研究进展………………．．52 致谢……………………………………………………………………………………………．66 个人简历…………………………………………………………………67 中文摘要 大鼠脑创伤后氯喹及头孢曲松对海马神经元 自噬调节的研究 摘 要 brain 创伤性脑损伤 Traumatic 之一，具有高发病率、高致残率和死亡率的特点。TBI后的继发性脑损害 可以导致神经功能缺失、智力障碍，给家庭和社会带来了巨大的痛苦和损 失，已成为全球性的社会问题。早年关于颅脑损伤导致神经元死亡的探索 主要集中在细胞凋亡方面，经过多年研究其发生过程及通路已经较为清 楚。近年来真核生物中细胞自噬发挥的作用越来越多的被人们所重视，成 为了科学界的研究热点。 最近的研究证实自噬存在于TBI损伤后的病理过程中，对自噬调控 的深入研究或许是会为治疗TBI后神经元继发性损伤和修复提供新的药 物作用靶点。因此，搞清神经细胞自噬的发生过程及调控靶点，阐明TBI 后神经细胞的最终死亡通路，对于探讨和避免TBI后神经细胞的损伤和 死亡，同时给予针对性的治疗具有重要意义。 以往本实验室的研究发现TBI后自噬主要发生在神经元而非胶质细 胞中，并对神经元中ERKl／2及JNK信号通路诱导其自噬的机制进行了 系列研究，但将神经元自噬作为药物的作用靶点仍需进一步的探讨。另一 方面，胶质细胞作为脑组织中含量最多的细胞，其中的重要因子谷氨酸转 们进一步的实验和探索。 目的：本实验通过应用自噬抑制剂氯喹和GLT-1激活剂头孢曲松进行 干预，检测药物对创伤大脑海马区GLT-1、炎性因子IL．1及自噬相关蛋 白LC3表达的影响，为以神经元自噬作为治疗靶点的研究开辟新的思路， 也为临床脑损伤的治疗提供实验依据。 对下列指标进行检测：@lie染色观察海马区形态学变化；②干湿比重称 中文摘要 量法检测脑组织含水量；③免疫组化共聚焦法检测LC3的表达定位情况； 在创伤后7．1l天行Morris水迷宫测试，对其空间学习和记忆能力进行检 测。实验结果的定量采用Gel．Doe软件分析系统。实验数据采用均数±标 准差，统计分析使用SPSSl8．0。两两比较使用q检验，组间比较使用单 因素方差分析，P 0．05表示差异具有统计学意义。 结果： l HE染色结果：Sham组海马区的神经元结构完整、数目较多、排列 规则，无明显的病理学改变。TBI组创伤后组织疏松，明显水肿，微血管 周围间隙和细胞周围间隙的增宽显著；海马区神经元结构破坏、排列紊乱、 数量显著减少，胞浆的嗜色性明显减弱，核固缩，核仁部分消失。氯喹组 组织水肿较轻，微血管周围间隙和细胞周围间隙只可见轻度增宽；海马区 神经元结构相对完整，数目与TBI组比较略有增多，胞核固缩较TBI组 明显恢复。头孢曲松组组织水肿不明显，微血管周围间隙和细胞周围间隙 略有增宽；海马区的神经元结构较完整，数目与TBI组比较有所增多， 胞核固缩较TBI组明显恢复。 2大鼠的空间学习记忆功能检测结果：TBI组的平均逃避潜伏期与 O天与TBI组比 逃避潜伏期显著缩短 P O．05 。头孢曲松组在伤后7．1 1天的空间搜索实验 较平均逃避潜伏期显著缩短 P O．05 。在创伤后l 过程中，与Sham组相比，T13I组穿越平台次数、平台所在象限路程比及 时间比均显著减少 尸 O．05 ；与TBI组相比，氯喹组以及头孢曲松组穿 越平台次数和2个比值均显著增加 尸 O．05 。 3脑组织水含量测定：Sham组在各个时间点的脑组织水含量未见差 异。TBI组的脑组织水含