大鼠脑挫伤后血调节蛋白的时序性表达.pdf

山西医科大学硕士学位论文 大鼠脑挫伤后血栓调节蛋白的时序性表达 大鼠脑挫伤后血栓调节蛋白的时序性表达 大大鼠鼠脑脑挫挫伤伤后后血血栓栓调调节节蛋蛋白白的的时时序序性性表表达达 摘要 摘要 摘摘要要 目 的： 目 的： ELISA SABC 目目 的的：：应用酶联免疫吸附 法、免疫组织化学 法检测大鼠脑 挫伤后血浆及脑组织中血栓调节蛋白（TM）的表达变化规律，以期为法医学实 践中推断脑损伤时间提供科学的参考依据。 方 法 方 法 64 SD 270±10g 方方 法法：选取 只健康成年 大鼠，雌雄不限，体重 由山西医 科大学实验动物中心提供 ，随机分为实验组 N 56 及对照组 n 8 ，实验组依据 挫伤时间不同再分为7个亚组。均实施腹腔麻醉后，实验组动物参照Feeney’s 法，采用模拟自由落体装置于颅骨中线旁3mm处造成脑挫伤模型，通过常规HE 染色认定挫伤部位及挫伤程度，对大鼠脑挫伤后7d内继发脑损伤的病理学改变 及TM 的分布特征进行光镜观察，同时分别于挫伤后 1h、4h、8h、12h、24h、 3d、7d七个时间点 n 8 取大鼠心血5ml，低温离心后留取血浆，置于-70℃保存 备用；取挫伤处脑组织100mg，制作成蜡块保存备用。对照组仅进行手术、钻孔 等同样处理，但不受打击，其余处理与实验组相同。应用酶联免疫吸附方法检测 脑挫伤后血浆中TM的时序性变化，对检测结果进行统计学分析；应用免疫组织 化学SABC 法观察挫伤部位血管内皮中TM 含量的时序性变化，结合图像分析 技术及统计学分析进行结果分析，观察上述指标与挫伤时间的关系。 结 果 结 果 1 TM 结结 果果：两种方法统计结果显示： 大鼠脑挫伤后 在血浆中的表达 于伤后4h开始出现升高， 24h达到峰值，随后血浆中含量逐渐减少，3d后仍有 少量表达但仍高于对照组，7d后表达基本恢复至接近对照组水平； 2 脑挫伤后 挫伤部位血管内皮中TM表达呈现出与血浆中相同变化规律。 结 论 结 论 TM 结结 论论：大鼠脑挫伤后血浆和脑组织中 表达随着挫伤时间呈规律性变 化，可望用于法医学鉴定及早期法医学损伤时间推断。酶联免疫吸附实验技术与 免疫组织化学技术操作简单易行，适合法医学研究及检案的需要。 关键词 关键词 关关键键词词：法医病理学；损伤时间推断；血栓调节蛋白；酶联免疫吸附；免 疫组织化学 I 山西医科大学硕士学位论文 Expressionof TM aftercerebralcontusionofrat Expressionof TM aftercerebralcontusionofrat EExxpprreessssiioonnooff TTMM aafftteerrcceerreebbrraallccoonnttuussiioonnooffrraatt Abstract Abstract AAbbssttrraacctt Objective Objective OObbjjeeccttiivvee To examinetheexpressiontrend ofTM inthebrain after cerebral ： contusion of rat by ELISA、immunohistochemical SABC，in order to explore the application for estimating the early time of brain contusion in forensic medicine aspect. Methods Methods MMeetthhooddss：The64 SDrats were divided into control group contain 8rats and experimental group contain 56 rats randomly. Experimental group were divided into 7 subgroup by dating of wound. After enforced intraperitoneal anesthesia, the rat ， modelof cerebral contusionwas founded by Feeney s method.The cerebralcontusion was performed on the side of 3mm from the middle of skull of experimental animal by using a gravitational force of a free falling weight. Tissu