人il-15基工程菌的实验研究.pdf

人lL一15基因工程菌的实验研究 摘 要 伯前，细胞因子的药物研究正在兴起。近期国外已获准 进入临床实验的重组人白细胞介素有：IL·1、IL一3、IL-4、 · 、 ，—一 ’制定，丫 、 目的：获得rhIL．15基因工程菌。 方法：从肺癌细胞株A549中提取细胞总RNA，RT·PCR 方法扩增出编码人IL．15成熟区基因的片段。该基因片段经 I、Xho 限制性内切酶ECOR I双酶切后，插入融合表达质 I、Xho I酶切位点，从而构建成重 粒pGEX．4T．2的ECOR 组融合蛋白表达质粒。阳性重组质粒转化感受态大肠杆菌 BL2l而得到工程菌。 结果：重组质粒插入片段的核酸序列测定与文献报导 IL．15蛋白成熟区核酸序列一致。该工程菌所表达融合蛋白 多数以包涵体形式存在，占菌体蛋白总量的39％。包涵体 提纯后纯度可达80％以上，复性后纯化的rhIL-15蛋白经MTT 法初步测定，具有促进CTLL-2细胞增殖能力。 结论：获得了具有生物活性的rhIL一15高效表达菌株。 关键词：IL．15重组转化包涵体 Human Recombinant on Studies Experimental its and Interleukin．15Vector Expression Expression in E．coli Abstract of as number An is inthe cytokines opening upsurge onesas well，such therapeuticreagents．Cytokines，recombinant and their as IL-16，orreceptors IL．1，IL-3，IL-4，IL-6，IL-12 intlleworld．Afor trials been forclinical have approved plan