猪ⅱ型圆环病毒cr诊断方法及其全基因组克隆的研究.pdf

摘 要 (猪圆环病毒(porcine 衰竭综合征的重要病原。斗 本研究设计一对PCV-2特异性引物，建立了PCV一2的PCR诊断方法。剐用该方法 从送检的来自河南、江西、广东、湖北四省的43份可疑病料中检测到了12份PCV一2阳 性病料，阳性率为27．9％。其中河南、江西的阳性率最高(33-3％)，说明，该病在这两 省的发病率较高。同时，在12份阳性病料中有5份还检测到了PPV或PRV，其中有一 份病料是流产死胎，表明该病常和PPV、PRV混合感染，并可垂直传播。咄 利用细胞培养技术，对来自河南某猪场的一PCV一2毒株进行了初步分离，并将该毒 株命名为PCV一2豫A株。用PCR方法检测病毒在PK一15细胞中的增殖情况。(结果表明在 接种PCV-2后，经连续传代培养25代后仍然可以在细胞中检测到PCV-2DNA。、 采用一对背对背引物，通过PCR扩增获得了PCV-2豫A株的全基因组序列并构建了 毒株间的核苷酸同源性均在90％以上，最高可达97％；整个复制型基因组共包含10个读 导出各ORF的氨基酸序列，发现豫A株各ORF编码的氨基酸中共有6个糖基化位点， 位点，分别位于：327．332bp，983-988bp和1022．1027bp处．≮ 行了病毒的初步分离工作，