猪传染性胃肠炎毒th-98株n基因在大肠杆菌中的表达及重组n蛋白的纯化.pdf

唐丽杰 中 文 摘 要 2002年5月 摘 要 {为建立对猪传染性胃肠炎快速有效的诊断方法。并试图在预防上提供有效的免疫制 剂，!本论文首次在我国对猪传染性胃肠炎病毒核衣壳蛋白基因进行了克隆、鉴定、表达 及重组核蛋白的纯化；并在细胞上对重组核农壳蛋白抗体的中和效力进行了测定。主要 结果如下： 以猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)TH～98强毒株基因组mRNA为模版，根据文献己发表 的猪传染性胃肠炎病毒核蛋白(N)基因cDNA序列及载体pProEⅫTb的多克隆酶切位点 序列，设计和合成一对引物，以】玎一PcR技术，扩增其N基因；将RT-PCR产物按正确的 a株， 阅读框架(ORF)定向克隆到载体pProEXHTb上，重组质粒PHN转化大肠杆菌阴5 通过酶切分析及序列测定表明获得了TGEvN基因的无性繁殖系。经DNAStar软件进行 N基因具有高度 氨基酸序列的