抗体工程制药详解.ppt

第六章　抗体工程制药 药学院药剂教研室 高秀蓉 第一节 概 述 一、基本概念 1、抗体（antibody，Ab） 2、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig ） 3、抗原（antigen，Ag） 抗原的分类 完全抗原（complete antigen） 简称抗原。是一类既有免疫原性，又有反应性性的物质。如大多数蛋白质、细菌、病毒、细菌外毒素等都是完全抗原。 不完全抗原 即半抗原，是只具有免疫反应性，而无免疫原性的物质。如：多糖、青霉素、磺胺剂和花粉等。半抗原与蛋白质载体结合后，就获得了免疫原性。 4、抗原表位（epitope） 抗体工程制药（antibody engineering pharmaceutics） 是指利用基因工程、细胞工程和转基因动植物技术生产抗体药物的过程。 抗体药物的应用 治疗肿瘤 目前在临床中使用的肿瘤治疗药物多数存在“敌我不分”的问题，即在杀死肿瘤细胞的同时，也破坏了人体正常细胞。 “生物导弹”为解决这个难题提供了一个理想的思路。“生物导弹”，即将各种毒素、放射性同位素、化疗药物与识别肿瘤特异抗原或肿瘤相关抗原的抗体偶联后，能够特异杀伤肿瘤细胞的一类药物。这种药物经由静脉注入人体内，药效分子集中作用于肿瘤细胞，既增强疗效又减少对机体的毒副作用。放射性同位素与抗体的偶联物在体内能将前者运至药靶部位，并通过其放射性活性杀伤靶细胞。 逆转器官移植排斥 进行器官移植时，可以采用某些抗体类药物来逆转器官移植引起的排斥反应。如最早批准（1986年）进入美国市场的治疗性抗体类药物——抗CD3单抗即被用于肾、心脏、肝脏移植排斥的逆转。 目前正在进行开发和已经投入市场的抗体药物主要有以下几种用途： 1．器官移植排斥反应的逆转； 2．肿瘤免疫诊断； 3．肿瘤免疫显像； 4．肿瘤导向治疗； 5．哮喘、牛皮癣、类风湿性关节炎、红斑狼疮、急性心梗、脓毒症、多发性硬化症及其他自身免疫性疾病； 6．抗独特型抗体作为分子瘤苗治疗肿瘤； 抗体工程的发展 抗体技术发展经历的三个阶段： 第一代：抗血清多克隆抗体 第二代：70年代中期，利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备的杂交瘤单克隆抗体（McAb） 第三代：基因工程抗体。 多克隆抗体(polyclonal antibody,pAb) 天然抗原分子中常含有多种抗原决定簇，以该物质刺激机体，体内多个B淋巴细胞被激活，产生的抗体实际上含有针对多种不同抗原表位的抗体，是多克隆抗体； 多克隆抗体的产生过程 动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。 获得多抗的途径： 动物免疫血清 恢复期患者血清 免疫接种人群血清 动物抗血清的优缺点 从动物血清提取抗体主要克服了人血浆来源有限造成的制约。 解决单抗特异性不高的理想方法是针对单一表位的特异性抗体-单克隆抗体。 2、单克隆抗体（monoclonal antibody， mAb ） 单克隆抗体的概念 如果能选出一个浆细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体（mAb）。 问题： 浆细胞在体外寿命短，难以培养和扩增，怎么办？ 解决办法 1975年，kohler和milstein将以下两种细胞融合： mAb制备过程 问题 从动物脾脏B细胞获得的单克隆抗体（即鼠源性抗体）对人具有较强的免疫原性，会产生人抗鼠抗体（HAMA)。 3、基因工程抗体（genetically engineered antibodies，gAb） 是通过基因工程技术获得抗体，即通过PCR技术获得抗体基因，与载体重组后，引入表达系统后，表达产生的抗体。 简言之，基因工程抗体就是将人源抗体的编码基因克隆到真核或原核表达系统中，体外表达人源化抗体 其根本出发点是解决抗体的鼠源性问题。 第二节 抗体分子的结构和功能 二、抗体的结构 （一）基本结构 1.轻链（light chain，L链） 2.重链（heavy chain，H链） 3.可变区（V区）和恒定区（C区） 可变区是指此区域内的氨基酸序列在不同的抗体中不同。 恒定区是指此区域内的氨基酸序列在不同的抗体中相同。 4.超变区（HVR区）和骨架区（FR） 5.铰链区（hinge region） （二）功能区 1.抗体的功能区 由一条多肽链折叠而成的球形结构域称为功能区。 每个功能区约由110 个氨基酸组成，具有不同生物学功能。 2.各功能区的功能 VH和VL共同构成抗原特异性结合部位。 （三）水解片段 Ig分子中有些部位在一定条件下，容易被蛋白酶水解为各种片段。